Invitrogen™ Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 594 HCS Assay

Mild fixering och rengöringsmedel permeabilisering tillräcklig för Click-iT EdU-detektionsreagens för att få tillgång till DNA. De Click-iT EdU Alexa Fluor 594 HCS Assay är ett överlägset alternativ till traditionella proliferationsanalyser som är optimerade för höginnehållsavbildningstillämpningar. I denna analys är den modifierade tymidinanalogen EdU effektivt införlivad i nysyntetiserat DNA och fluorescerande märkt med en ljus, fotostabil Alexa Fluor färgämne i en snabb, mycket specifik klickreaktion. Denna fluorescerande märkning av prolifererande celler är korrekt och kompatibel med antikroppsmetoder på grund av det milda klickprotokollet. De mest exakta metoderna för proliferation-detektion är baserade på inkorporering och mätning av nukleosidanaloger i nysyntetiserat DNA, med bromodeoxiuridin (BrdU) en vanlig analog. BrdU-märkt DNA kvantifieras med anti-BrdU-antikroppar efter DNA-denaturering med hårda metoder (HCl, värme eller enzymer) för att exponera BrdU-molekylerna. Detta steg är tidskrävande och svårt att utföra konsekvent. Den hårda behandlingen kan också påverka provets integritet och kvalitet negativt, vilket gör samfärgning med andra antikroppar utmanande.

• Enkelt: fungerar första gången, varje gång, på kortare tid
• Effektiv: inga denatureringssteg eller hård behandling krävs
• Innehållsrika resultat: bättre bevarande av cellmorfologi, antigenstruktur och DNA-integritet
• Konsekvent: inte beroende av variabla antikroppspartier för detektion
• Mindre farligt

Överlägsen spridningsmetod

De Click-iT EdU Alexa Fluor 594 HCS-analys ger ett överlägset alternativ till BrdU-analyser för att mäta cellproliferation. EdU (5-etynyl-2'-deoxiuridin) är en nukleosidanalog av tymidin och inkorporeras i DNA under aktiv DNA-syntes. Med Click-iT EdU, mild fixering och detergentpermeabilisering räcker för de små molekylbaserade Click-iT EdU-detektionsreagens för att få tillgång till DNA. Som en konsekvens av detta Click-iT EdU HCS-analysen är inte bara lätt att använda, utan mer exakt och kompatibel med cellcykelanalys och andra intracellulära eller extracellulära mål för verkligt innehållsrika resultat.

Click-iTassay kan användas på celler i kultur eller in vivo efter administrering av EdU genom utfodring eller injektionsmetoder.

Click-iTassay kan användas med BrdU i dubbelpulsexperiment genom att använda antikroppen ant-BrdU (klon MoBu-1), som inte korsreagerar med EdU.

Click-iT-teknologin är kompatibel med immunhistokemiska, immunocytokemiska och fluorescerande färgämnen som är fixeringstoleranta eller designade för märkning av fixerade celler.

Cellanalys, cellcykel, cellproliferation, cellviabilitet, proliferation och funktion, cellulär avbildning, DNA-replikation och reparation, höginnehållsscreening (HCS)