Invitrogen™ Dextran, Tetrametylrhodamin, 70 000 MW, Lysinfixbar

Märkta dextraner är hydrofila polysackarider som oftast används i mikroskopistudier för att övervaka celldelning, spåra rörelsen av levande celler och för att rapportera de hydrodynamiska egenskaperna hos den cytoplasmatiska matrisen. Det märkta dextranet införs vanligtvis i cellerna via mikroinjektion.

Dextran specifikationer :
• Etikett (Ex/Em): Tetrametylrhodamin (555/580)
• Storlek: 70 000 MW
• Avgift: Anjonisk
• Fixbar: Fixerbar via Lysine

High Manufacturing Standards of Molecular Probes™ Dextrans
Vi erbjuder mer än 50 fluorescerande och biotinylerade dextrankonjugat i flera molekylviktsintervall. Dextraner är hydrofila polysackarider som kännetecknas av deras måttliga till höga molekylvikt, goda vattenlöslighet och låga toxicitet. De uppvisar också i allmänhet låg immunogenitet. Dextraner är biologiskt inerta på grund av deras ovanliga poly-(α -D-1,6-glukos), vilket gör dem resistenta mot klyvning av de flesta endogena cellulära glykosidaser.

I de flesta fall, Molecular Probes™ fluorescerande dextraner är mycket ljusare och har högre negativ laddning än dextraner tillgängliga från andra källor. Dessutom använder vi rigorösa metoder för att ta bort så mycket okonjugerat färgämne som möjligt, och analyserar sedan våra dextrankonjugat med tunnskiktskromatografi för att säkerställa frånvaron av föroreningar med låg molekylvikt.

Ett brett urval av substituenter och molekylvikter
Molecular Probes™ dextraner är konjugerade till biotin eller en mängd olika fluoroforer, inklusive sju av våra Alexa Fluor™ färgämnen (Molecular Probes dextrankonjugat –Tabell 14.4) och är tillgängliga i dessa nominella molekylvikter (MW): 3 000; 10 000; 40 000; 70 000; 500 000; och 2 000 000 dalton.

Dextrans nettoladdning och fixerbarhet
Vi använder succinimidylkoppling av våra färgämnen till dextranmolekylen, vilket i de flesta fall resulterar i ett neutralt eller anjoniskt dextran. Reaktionen som används för att producera Rhodamine Green™ och Alexa Fluor™ 488 dextraner resulterar i att slutprodukten är neutral, anjonisk eller katjonisk. De Alexa Fluor™ , Cascade Blue™ , lucifergul, fluorescein och Oregon Green™ dextraner är i sig anjoniska, medan de flesta dextraner är märkta med zwitterjonisk rhodamin B, tetrametylrhodamin och Texas Red™ färgämnen är i huvudsak neutrala. För att producera mer anjoniska dextraner har vi utvecklat ett patentskyddat förfarande för att lägga till negativt laddade grupper till dextranbärarna; dessa produkter är betecknade“ polyanjonisk” dextrans.

Vissa tillämpningar kräver att dextranspårämnet behandlas med formaldehyd eller glutaraldehyd för efterföljande analys. För dessa applikationer erbjuder vi“ lysinfixerbar” versioner av de flesta av våra dextrankonjugat av fluoroforer eller biotin. Dessa dextraner har kovalent bundna lysinrester som tillåter dextranspårämnen att konjugeras till omgivande biomolekyler genom aldehydmedierad fixering för efterföljande detektion genom immunhistokemiska och ultrastrukturella tekniker. Vi har också visat att alla våra 10 000 MW Alexa Fluor™ dextrankonjugat kan fixeras med aldehydbaserade fixeringsmedel.

Nyckelapplikationer som använder märkta dextraner
Det finns en mängd citat som beskriver användningen av märkta dextraner. Några av de vanligaste användningsområdena inkluderar:
• Neuronal spårning (anterograd och retrograd) i levande celler
•Spårning av cellhärkomst i levande celler
•Neuroanatomisk spårning
•Undersöka intercellulär kommunikation (t.ex. i gap junctions, under sårläkning och under embryonal utveckling)
•Undersöker vaskulär permeabilitet och –blod-hjärnbarriärens integritet
•Spårning av endocytos
•Övervakning av försurning (–vissa dextranfärgämneskonjugat är pH-känsliga)
•Att studera de hydrodynamiska egenskaperna hos den cytoplasmatiska matrisen.

Dextrankonjugat är i allmänhet lösliga i vattenhaltiga buffertar till minst 10 mg/ml. Deras löslighet minskar när molekylvikten ökar; sålunda är den maximala lösligheten i vattenhaltig buffert ca 100 mg/ml för 3 000 MW dextraner, 50 mg/ml för 10 000 MW dextraner, 25 mg/ml för 70 000 MW dextraner och 5 –10 mg/ml för 500 000 och 02000 MW dextraner.

Endast för forskningsanvändning. Inte avsett för terapeutisk eller diagnostisk användning av djur eller människor.