Invitrogen™ LysoTracker™ Röd DND-99, specialförpackning

LysoTracker Red DND-99 är ett cellgenomsläppligt rött fluorescerande färgämne som färgar sura fack i en cell, såsom lysosomer. Röd DND-99 har ett excitations- och emissionsmaximum på 577/590 nm och kan effektivt exciteras med ett TRITC-filter. LysoTracker sonder finns i en mängd olika fluorescerande färger. Även om det inte tvärbinds med celler, LysoTracker Röd DND-99 visar övergående retention efter metanolfri formaldehydfixering under en kort tidsperiod.

Enkel, mycket specifik, ettstegsfärgning och spårning av sura organeller
LysoTracker sonder består av en hydrofob fluorofor kopplad till en svag bas som endast är delvis protonerad vid neutralt pH. I ett neutralt laddat tillstånd, LysoTracker sonder kan fritt diffundera över intakta plasmamembran av levande celler. På grund av de inneboende sura egenskaperna i lysosomen protoneras den svagt basiska delen vid diffusion in i lysosomen. I detta laddade tillstånd diffunderar sonden inte lätt över organellmembranet, vilket ger en lokal ackumulering för distinkt färgning av sura organeller såsom lysosomer. Effektiv vid nanomolära koncentrationer, LysoTracker sonder är mycket selektiva för sura organeller och ger enkel enstegsfärgning som inte är beroende av antikroppsdetektion.

Lysosomer är sura till sin natur på grund av produktion och lagring av matsmältningsenzymer (hydrolaser). Lysosomers sura miljö möjliggör nedbrytning av kolhydrater, lipider, nukleinsyror och peptider. Extracellulära proteiner, virus eller bakterier kan också internaliseras och transporteras till lysosomen för nedbrytning via den lysosomala proteolysvägen. Dessutom blir felveckade proteiner eller skadade organeller mål för lysosomal nedbrytning via induktion av autofagi. Autofagi är viktigt för celldifferentiering, överlevnad under näringsbrist och normal tillväxtkontroll. Den inneboende sura naturen i lysosomer, och varje förändring av pH under biosyntes eller patogenes, kan utnyttjas av olika prober som svarar på en sur miljö. LysoTracker produkter tillhandahåller fluorescensdetektion för färgning av levande celler i sura miljöer och kan användas för märkning och spårning av sura organeller såsom lysosomer.