missing translation for 'onlineSavingsMsg'
Läs mer
Läs mer
Multi-Copy Pichia Expression Kit
Description
- Multi-Copy Pichia Expression Kit innehåller vektorerna pPIC3.5K, pPIC9K och pAO815 för produktion och urval av Pichia -stammar som innehåller mer än en kopia av genen av intresse
- I många fall har ökat antal kopior lett till ökade uttrycksnivåer
- Dessa vektorer är också tillgängliga separat
pPIC9K och pPIC3.5K
- pPIC9K- och pPIC3.5K-vektorerna bär kanamycinresistensgenen som ger resistens mot Geneticin™ Reagens i Pichi a
- Spontan generering av multipla insättningshändelser kan identifieras genom resistens mot ökade nivåer av Geneticin™ Reagens
- Pichia- transformanter selekteras på histidinbristmedium och screenas för deras resistensnivå mot Geneticin™ Reagens
- Förmågan att växa i höga koncentrationer av Geneticin™ indikerar att flera kopior av kanamycinresistensgenen och genen av intresse är integrerade i genomet
- pPIC9K-vektorn styr utsöndring av uttryckta proteiner medan proteiner uttryckta från pPIC3.5K förblir intracellulära.
pAO815
- pAO815 är en Pichia -expressionsvektor designad för att klona flera kopior av en gen till en enda vektor
- Vektorn innehåller ett Bgl II-ställe uppströms om 5´AOX1- genen och ett unikt Ba mH I-ställe nedströms om 3´AOX1- transkriptionstermineringssignal (TT).
- Fyra steg krävs för att generera flera kopior av genen av intresse:
- 1. Genen klonas in i det unika Ec oRI-stället i vektorn.
- 2. Konstruktionen digereras med Ba mH I och Bgl II för att frigöra“ uttryckskassett” som innehåller AOX1- promotom, genen av intresse och 3´AOX1 TT.
- 3. Concatemerer av expressionskassetten genereras genom ligering in vitro .
- 4. De multipla kopiorna infogas tillbaka i pAO815-vektorn och transformeras till Pichi a.
Specifications
Specifications
| Antibiotikaresistens bakterie | Ampicillin (AmpR), Gentamicin (GmR) |
| Bakterie- eller jäststam | KM71 |
| Innehåll och lagring | Multi-Copy Pichia Expression Kit innehåller 20μ g var och en av vektorerna pPIC3.5K, pPIC9K och pAO815, Pichia pastoris- stammar GS115 (his 4), KM71 (arg4 his4 aox1::ARG 4), kontrollstam GS115 Albumin, kontrollstam GS115β -gal, Spheroplast Transformation Kit och 2μ g var 5´AOX 1, 3´AOX 1, ochα -faktorsekvenseringsprimrar. Vektorerna pP1C9K, pPIC3.5K och pAO815 är också tillgängliga separat. Förvara vektorer och primrar vid -20 °C. Förvara stammar i rumstemperatur. Alla komponenter är garanterat hållbara i 6 månader när de förvaras på rätt sätt. |
| Kloningsmetod | Restriktionsenzym/MCS |
| Celltyp | Jästceller |
| Formatera | Kit |
| Promotor | AOX1 |
| Art | P. pastoris |
| Vektor | pPIC |
| Uttrycksmekanism | Cellbaserat uttryck |
| Show More |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Product Title
By clicking Submit, you acknowledge that you may be contacted by Fisher Scientific in regards to the feedback you have provided in this form. We will not share your information for any other purposes. All contact information provided shall also be maintained in accordance with our Privacy Policy.
Spot an opportunity for improvement?