Invitrogen™ MultiShot™ Stbl3™ Kemiskt kompetenta E. coli-celler , 96-brunnsplatta

Egenskaper hos MultiShot Stbl3 kompetenta celler inkluderar:

• Förväntad effektivitet av >1 x 10⁸ transformanter/μg plasmid-DNA
• Optimal prestanda för utbredning av lentivirala vektorer och upprätthållande av direkta upprepningar
• Förbättrad kapacitet för genomisk DNA-kloning (mcrB, mrr och hsdS20)
• Kapabel att producera höga DNA-avkastningar

Stammen Stbl3 har varit avgörande för många tillämpningar, inklusive genomredigerings-CRISPR-arbetsflöden, vaccinutveckling (inklusive SARS-CoV-2-vaccinforskning), kloning och underhåll av vektorer med flera upprepningar (t.ex. genkodande protein med upprepad sekvens). Transformationseffektiviteten hos MultiShot Stbl3 kemiskt kompetenta celler är >1 x 10⁸ cfu/μg plasmid-DNA.

Stammen Stbl3 härstammar från HB101 E. coli-stammen med ett hybrid K-12- och B-stamgenom. Den innehåller recA13-allelen av recA-mutationen som minskar förekomsten av ospecifik rekombination i klonat DNA. Mutationer i det Stbl3 metyleringsberoende restriktionssystemet (mcrB, mrr och hsdS20) möjliggör konstruktion av kloning av genomiskt DNA. Denna stam har ändenA1+, en ospecifik endonukleas I som bryter ner DNA. Stammen Stbl3 reproducerar också mer plasmid-DNA än DH-stammar (10 gånger eller mer plasmid-DNA än TOP10 stammen) och producerar hållbart högtiter lentivirus.

MultiShot Stbl3 Kompetenta celler erbjuder:

• Förväntad effektivitet av >1 x 10⁸ transformanter/μg plasmid-DNA
• Optimal prestanda för utbredning av lentivirala vektorer och upprätthållande av direkta upprepningar
• Förbättrad kapacitet för genomisk DNA-kloning (mcrB, mrr och hsdS20)
• Kapabel att producera höga DNA-avkastningar

Notera: För optimal prestanda och för att bibehålla plasmid med komplexa upprepade sekvenser Stbl3 bör celler odlas vid 30 °C. När du utför plasmid-DNA-isolering från Stbl3 celler med vildtyp-endonukleas I (slutA1+), se till att buffertar innehåller 10 mM EDTA. EDTA inaktiverar endonukleaset och undviker DNA-hacking och vektornedbrytning (följ plasmid-DNA-reningskitets instruktioner för slutstammarav A1+ E. coli ).

Genotyp

F^–mcrB mrr hsdS20(r_B–, m_B–) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5λ – leu mtl-1