Invitrogen™ MultiShot™ StripWell BL21 Star™ (DE3) Kompetenta celler

MultiShot StripWell BL21 Star (DE3) kemiskt kompetenta E. coli -celler är kloningskompetenta celler designade för tillämpningar som kräver högnivåexpression av icke-toxiska rekombinanta proteiner från T7-promotorbaserade expressionssystem med lågt antal kopior. Konstruerad för att bäraλ DE3-lysogen som innehåller T7 RNA-polymerasgenen under kontroll av lac UV5-promotorn, dessa celler är föralikvoterade i ett rack som innehåller 12 remsor med 8 brunnar för att öka produktiviteten för genomströmning av bakteriella transformationer.

Förbättrat uttryck av icke-toxiska rekombinanta proteiner
BL21 (DE3) E. coli -stammen är en av de mest populära värdstammarna för att producera rekombinanta proteiner och anpassad för forskning eller industriella tillämpningar. IPTG krävs för att inducera uttryck av T7 RNA-polymeraskaskadsystemet som i sin tur transkriberar den T7-promotorreglerade målgenen.

BL21(DE3)-stammen är härledd från E. coli B-stammen som inte innehåller lon-proteaset och som också har brist på det yttre membranproteaset OmpT. Avsaknaden av två viktiga proteaser minskar nedbrytningen av heterologa proteiner som uttrycks i stammarna. Dessutom gör flera andra stamegenskaper dem speciellt lämpade för proteinproduktion, nämligen snabb tillväxt i minimalt medium, en lägre acetatproduktion när de odlas i högt glukosmedium och en förmåga att nå hög celldensitet.

MultiShot StripWell BL21 Star (DE3) Kompetenta celler erbjuder förbättrad mRNA-stabilitet på grund av en mutation i RNaseE-genen ( rne 131) som minskar nivåerna av endogena RNaser och mRNA-nedbrytning, vilket ökar stabiliteten hos mRNA-transkript och ökar proteinutbytet. De BL21 Star stam har högre basal expression av heterologa gener än BL21 (DE3) stammar, på grund av den ökade stabiliteten av mRNA. Således stammar som t.ex BL21-AI rekommenderas för giftigt proteinuttryck.

Ett skott BL21 Star (DE3) Kemiskt kompetent E. coli -erbjudande:
• Omvandlingseffektivitet av> 1 x 10 ⁷ cfu/μ g plasmid-DNA
• Jon- och OmpT-proteasbrist som minskar nedbrytningen av rekombinant protein
• Optimerad för användning med lågt kopietal, T7-promotorbaserade plasmider
•rne 131-mutation som minskar nivåerna av endogena RNaser och mRNA-nedbrytning
•hsd S-mutation som möjliggör effektiv transformation av ometylerat DNA
• Snabb tillväxt i minimalt medium och förmåga att nå hög celltäthet

MultiShot StripWell flexibelt format
Varje StripWell med åtta anslutna rör är designade med samma enkelrörsfunktioner för engångsbruk som våra One Shot-formatrör. Detta format gör att alla steg i transformationsprotokollet, upp till plätering, kan ske i samma rör, vilket sparar tid och minskar risken för kontaminering. Efter tillsats av DNA, MultiShot StripWell kompetenta celler kan transformeras genom värmechock vid 42 C °med hjälp av ett vattenbad, alla i samma rör.

StripWell-rören kan enkelt skäras för att tillåta transformationer i ett enda rör, vilket eliminerar bortkastade alikvoter av celler och undviker frysning-upptining som kan resultera i minskad transformationseffektivitet.

Fördelarna med MultiShot StripWell-format inkluderar:
• Ökad produktivitet —lämplig för experiment med hög genomströmning
•Maximal flexibilitet —transformerar så få som 1 rör eller så många som 96 från StripWell-stället
•Bekant bekvämlighet —lägg till DNA direkt till celler, värmechock och återhämta sig i samma

rör Genotyp
^–F omp T hsd SB (r _B ^–, m _B ^–) gal dcm rne 131 (DE3)

Hitta den stam och det format du behöver
• Vi erbjuder många E. coli- stammar och format av kemiskt kompetenta och elektrokompetenta celler för att möta transformationsbehov.
• För transformation med hög genomströmning, välj från vår samling av MultiShot formaterade kompceller.
• Vi erbjuder en mängd olika system för uttryck av rekombinanta proteiner i E. coli.