Invitrogen™ MultiShot™ StripWell Stbl3™ Kompetenta celler

MultiShot StripWell Stbl3 Kemiskt kompetenta E. coli -celler är kloningskompetenta celler designade för kloning av direkta upprepningar som finns i lentivirala expressionsvektorer. Stbl3 celler minskar frekvensen av homolog rekombination och föralikvoteras i ett rack som innehåller 12 remsor med 8 brunnar för att öka produktiviteten för genomströmning av bakteriella transformationer.

Uppnå anmärkningsvärd stabilitet hos lentivirala vektorer i Stbl3 celler
MultiShot StripWell Stbl3 Kompetenta celler minskar frekvensen av homolog rekombination av direkta upprepningar som finns i lentivirala vektorer (t.ex. ViraPower Lentiviral Expression-kit) och andra retrovirala vektorer (t.ex. instabilitetsbenägna HIV-baserade plasmider). De Stbl3 stam har använts i många applikationer, inklusive genomredigering av CRISPR-arbetsflöden, vaccinutveckling och kloning och underhåll av vektorer med flera upprepningar (t.ex. genkodande protein med upprepad sekvens). Omvandlingseffektiviteten av MultiShot StripWell Stbl3 kemiskt kompetenta E. coli -celler är> 1 x 10 ⁷ cfu/μ g plasmid-DNA.

De Stbl3E. coli- stam är härledd från HB101-stammen (med en hybrid K-12- och B-stamgenom). Även om Stbl3 stam innehåller rec A13-allelen av rec A-mutationen som minskar förekomsten av ospecifik rekombination i klonat DNA, förmågan hos Stbl3 stam för att upprätthålla instabila inserts drivs enligt uppgift av andra genetiska egenskaper. Mutationer i Stbl3 metyleringsberoende restriktionssystem ( mcr B, mrr, och hsd S20) möjliggör konstruktion av kloning av genomiskt DNA. Denna stam är ände A1+, sålunda finns ett ospecifikt endonukleas I som smälter DNA i cellerna. Stbl3 ger reproducerbart mycket mer plasmid-DNA än DH-stammar (t.ex. 10 gånger eller mer plasmid-DNA än TOP10 stam) och producerar hållbart lentivirus med hög titer.

MultiShot StripWell Stbl3 Kompetenta celler erbjuder:
• Förväntad effektivitet på> 1 x 10 ⁷ transformanter/μ g plasmid-DNA
• Optimal prestanda för spridning av lentivirala vektorer och underhåll av direkta upprepningar
• Förbättrad genomisk DNA-kloningskapacitet ( mcr B, mrr och hsd S20)
• Förmåga att producera höga DNA-utbyten

Obs: För optimal prestanda bibehålla plasmider med komplexa upprepade sekvenser, Stbl3 celler bör odlas vid 30 °C. När man utför plasmid-DNA-isolering från Stbl3 celler med vildtypsendonukleas I ( ände A1+), se till att buffertar innehåller 10 mM EDTA. EDTA kommer att inaktivera endonukleaset och undvika DNA-nicking och vektornedbrytning (följ instruktionerna för plasmid-DNA-reningskit för E. coli -stammar i slutet av A1+).

MultiShot StripWell flexibelt format
Varje StripWell med åtta anslutna rör är designade med samma enkelrörsfunktioner för engångsbruk som våra One Shot-formatrör. Detta format gör att alla steg i transformationsprotokollet, upp till plätering, kan ske i samma rör, vilket sparar tid och minskar risken för kontaminering. Efter tillsats av DNA, MultiShot StripWell kompetenta celler kan transformeras genom värmechock vid 42 °C med hjälp av ett vattenbad, alla i samma rör.

StripWell-rören kan skäras för att tillåta omvandlingar i ett enda rör, vilket eliminerar bortkastade alikvoter och undviker frys- och tinningscykler som kan resultera i minskad omvandlingseffektivitet.

Fördelarna med MultiShot StripWell-format inkluderar:
• Ökad produktivitet —lämplig för experiment med hög genomströmning
•Maximal flexibilitet —transformerar så få som 1 rör eller så många som 96 från StripWell-stället
•Bekant bekvämlighet —lägg DNA direkt till celler, värmechock och återhämta sig i samma

rör Genotyp
^–F mcr B mrr hsd S20(r _B , –mB– ) rec A13 sup E44 ara -14 gal K2 lac Y1 pro A2 rps L20(StrR) xyl -5λ–leu mtl -

1 Hitta stammen och formatet du behöver
• Andra Stbl-stammar finns med annan genetisk bakgrund.
• Många andra E. coli -stammar och format av kemiskt kompetenta och elektrokompetenta celler finns också tillgängliga för att möta specifika transformationsbehov.
• För transformation med hög genomströmning, välj från vår samling av MultiShot formaterade kompceller eller maila oss för anpassade formateringsalternativ.
• Vi erbjuder bakteriella tillväxtmedier i olika format.