Thermo Scientific™ NcoI (10 U/μ L)

5'...C▵CATG G...3'

3'...GGTAC▵C...5'

Villkor för 100 % aktivitet:

• 1X Buffer Tango: 33 mM Tris-acetat (pH 7,9 vid 37 °C), 10 mM Mg-acetat, 66 mM K-acetat och 0,1 mg/ml BSA
• Inkubera vid 37 °C

Förvaringsbuffert:

• NcoI tillhandahålls i: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 vid 25 °C), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA och 50 % (v/v) glycerol

Ligering och återklyvning:

• Efter 50-faldig översmältning med NcoI kan mer än 95 % av DNA-fragmenten ligeras och skäras igen

Metyleringseffekter:

• Dam: överlappar aldrig— ingen effekt
• Dcm: överlappar aldrig— ingen effekt
• CpG: överlappar aldrig— ingen effekt
• EcoKI: överlappar aldrig— ingen effekt
• EcoBI: överlappar aldrig— ingen effekt

Digestion av agaros-inbäddat DNA:

• Minst 5 enheter av enzymet krävs för fullständig nedbrytning av μ1 g agarosinbäddat lambda-DNA på 16 timmar

Kompatibla ändar:

• AflIII, Pscl, Btgl, Eco130I, FatI, Pagl

Anmärkning:

Lågt salt, högt glycerol (> 5 %) koncentrationer, >pH 8,0 eller ett stort överskott av enzym kan resultera i stjärnaktivitet.