Invitrogen™ NovaBright™ Phospha-Light™ EXP Analyskit för SEAP (Secreted Placental Alkaline Phosphatase) Reporter Gendetektion

Känslig detektering av alkaliskt fosfatasreporterenzym möjliggör ett stort antal tillämpningar inom många områden inom biovetenskaplig forskning, inklusive genuttryck, virusfunktionsanalyser, vaccinutveckling, utveckling av virala vektorer och genleveransmetoder för genterapi, övervakning av genuttryck in vivo och nya cellulära funktionsanalyser. Denna SEAP-analys är en av de enklaste och snabbaste metoderna för att optimera transfektionseffektiviteten. Denna analys har använts för en mängd olika virala funktionella analyser, inklusive virala genuttrycksanalyser, viral replikation, viral fusogenicitet, virusneutralisering och viral-medierad cell-cellfusion och viral infektivitet. Användning av SEAP-reporterproteinet är mycket möjliggörande för in vivo-reportergenanalyser, genom att analysera serumprover från transgena, transfekterade eller virala vektorinfekterade djur. De NovaBright reportergenanalyssystem har använts för att mäta SEAP-nivåer i sera från transgena eller transfekterade hela djur, inklusive sera från mus, råtta, silkesapa, apa och gris, och i allantoisvätska från kycklingägg. Mus-SEAP-proteinet (mSEAP) har nyligen utvecklats för förbättrad SEAP-proteinstabilitet hos transgena möss, och NovaBright SEAP-analys har använts för känslig detektion av mSEAP. Förutom tillämpningar av reportergen (genuttryck) används analyssystemet för att mäta SEAP som en funktionell rapportör för receptor-ligandbindningsanalyser med en SEAP-ligandchimär, proteasmedierad utsöndring och för sekretionsvägaktivitet. De NovaBright analyssystem kan användas för cellulär mätning av icke-placentalt alkaliskt fosfatas som en biomarkör.

Detta kit ger en mycket enklare procedur än andra analyser. Analysen är homogen och kräver endast två lösningar som båda levereras färdiga att använda. Förlängd glödljusemissionskinetik ger en stabil ljussignal för flexibilitet vid läsningstid. Analyssignalen mäts i en enkel luminometer utan injektorer. SEAP är ett reporterprotein som utsöndras i cellodlingsmediet och detekteras genom att testa alikvoter av mediet. Eftersom SEAP släpps ut i mediet är cellysering onödig. Analysen tillåter dock även detektering av placental alkalisk fosfas (PLAP) isoenzym efter cellys.

• Andra generationens kemiluminescerande reportergenanalys
• Enkelt, snabbt protokoll, kompatibelt med hög genomströmning
• Ultrakänslig detektering av utsöndrat placenta alkaliskt fosfatas
• Kompatibilitet med automatiserade plattformar med triggerlösning/positioner redan på plats

• Detektionsmetod: Kemiluminescerande
• För användning med utrustning: Luminometer (mikroplatta)
• Format: 96-brunnars tallrik
• Hög kapacitetskompatibilitet: Kompatibel med hög kapacitet
• Avläsning: Slutpunkt
• Substrat: CSPD
• Substrategenskaper: Kemiskt substrat
• Substrattyp: AP (Alkaliskt fosfatas) Substrat
• Målenzym: Alkaliskt fosfatas från placenta