Invitrogen™ Digitonin (5 %)

Digitonin, även känd som digitin, är ett milt, icke-joniskt rengöringsmedel med en kolesterolliknande struktur som gör att den kan vattensolubilisera lipider. Det är användbart för att permeabilisera celler och kan användas som en cytotoxicitetskemi positiv kontroll. Dessutom bevarar den den naturliga lipidmiljön i membranproteinkomplex och kan användas för att solubilisera membranbundna proteiner. Digitonin har en molekylformel på C ₅₆ H ₉₂ O ₂₉ och en molekylvikt på 1229 Dalton.

Digitonin tvättmedelslösning har många fler applikationer. Det används för att förbereda inhemska proteinprover för analys på NativePAGE Gelsystem. Ingår i NativePAGE Sample Prep Kit (Cat No. BN2008), denna färdiga rengöringsmedelslösning förbättrar lösligheten av hydrofoba proteiner och membranproteiner under provberedningen. Prover framställda med 10 % DDM, 5 % digitonin eller NativePAGE Sample Prep Kit är kompatibla med NativePAGE Novex Bis-Tris Geler för naturlig elektrofores och har ökad upplösning och minskad ränder. Dessutom, före strukturell bestämning genom kryo-EM eller kristallisation, kan digitonin användas för att solubilisera membranproteiner (vanligtvis vid –1 2 % vikt/volym) och som en tvättbuffert.

Det är viktigt att notera för provberedning att digitonin-tvättmedlets micellstorlek är∼ 70 kDa och används vanligtvis i en koncentration som är 1 –2X den kritiska micellkoncentrationen (CMC).

Vidare kan digitonin användas som en spik i renat protein vid CMC-koncentration för att hjälpa till med partikelfördelning och föredragen orientering på rutnätet under förglasningsprocessen. Dessutom ger digitonin effektiv antikroppspenetration i vävnadssektioner och är kompatibel med immunhistokemi (IHC) färgning. Digitonin vid en slutlig koncentration av 0,–2 0,5 % i buffert är kompatibelt med IHC.

OBS: Om 5% digitoninlösningen faller ut ur lösningen, värm lösningen till 37 C °och skaka försiktigt för att lösa upp fällningen.