Invitrogen™ Digitonin (5 %)

Digitonin, även känt som digitin, är ett milt, icke-joniskt rengöringsmedel med en kolesterolliknande struktur som gör att det kan vattenlösliga lipider. Det är användbart för permeabiliserande celler och kan användas som positiv kontroll för cytotoxicitetskemi. Dessutom bevarar det den naturliga lipidmiljön i membranprotein-komplex och kan användas för att lösliga membranbundna proteiner. Digitonin har en molekylformel på C,₅₆H,₉₂O_{, 29} och en molekylvikt på 1229 Dalton.

Digitonin tvättmedelslösning har många fler användningsområden. Den används för att förbereda inhemska proteinprover för analys i NativePAGE Gel System. Inkluderad i provförberedelsepaketet NativePAGE (Kat. BN2008), förbättrar denna färdiga tvättmedel lösligheten hos hydrofoba och membranproteiner under provberedning. Prover som tillverkats med 10 % DDM, 5 % digitonin eller NativePAGE Sample Prep Kit är kompatibla med NativePAGE Novex Bis-Tris Gels för naturlig elektrofores och har ökad upplösning och minskad strimmning. Dessutom kan digitonin innan strukturell bestämning med kryo-EM eller kristallisation används, för att lösliga membranproteiner (vanligtvis vid 12 –% w/v) och som en tvättbuffert.

Det är viktigt att notera vid provberedning att digitonin-tvättmedelsmicellstorleken är ∼70 kDa och vanligtvis används vid en koncentration som är 12 –gånger den kritiska misellkoncentrationen (CMC).

Dessutom kan digitonin användas som en topp i renat protein vid CMC-koncentration för att hjälpa till med partikelfördelning och föredragen orientering på gallret under vitrifieringsprocessen. Dessutom ger digitonin effektiv antikroppspenetration i vävnadssektioner och är kompatibelt med immunhistokemisk (IHC) färgning. Digitonin vid en slutlig koncentration på 0,2 0,5 –% i buffert är kompatibelt med IHC.

OBS: Om 5% digitoninlösningen fälls ut ur lösningen, värm lösningen vid 95 °C i 5 minuter och virvla sedan för att lösa upp fällningen. Kyl ner till rumstemperatur innan användning.