Macherey-Nagel™ NucleoSpin™ RNA Midi kit för RNA-rening

NucleoSpin™ RNA L tillåter isolering av DNA-free högkvalitativt RNA från stora mängder utgångsmaterial, t.ex. odlade celler, vävnad, bakterier och jäst. Celler lyseras genom inkubation i en lösning som innehåller stora mängder kaotropa joner. Denna lysbuffert inaktiverar omedelbart RNaser och skapar lämpliga bindningsbetingelser som gynnar adsorption av RNA till kiseldioxidmembranet. Efter lysering uppnås homogenisering och minskning av viskositeten genom filtrering med NucleoSpin™ filter L-enheter. Kontaminerande DNA bundet till kiseldioxidmembranet avlägsnas med en DNas I-lösning som appliceras direkt på kiseldioxidmembranet under beredningen. Optimala förhållanden för DNaset uppnås genom att tvätta kiseldioxidmembranet med en specifik avsaltningsbuffert före behandling. Salter, metaboliter och makromolekylära cellkomponenter avlägsnas genom enkla tvättsteg med två olika buffertar. Totalt RNA elueras slutligen med RNasfritt vatten. Kitkomponenter: NucleoSpin™ RNA L-kolonner med 15 mL uppsamlingsrör, 15 mL elueringsrör, NucleoSpin™ filter L, buffertar, RNas-fritt DNas I, DNas I-reaktionsbuffert, RNas-fritt vatten.

• DNas I ingår för avlägsnande av genomiskt DNA plus NucleoSpin™ filter för homogenisering och minskning av lysatets viskositet
• Silica membranteknologi
• Utbyte: 180 μg (10 ⁷ Hela-celler), 620 μg (4 x 10 ⁷ Hela-celler)
• Provmaterial:< 5 x 10 ⁷ odlade celler,< 10 ¹⁰ bakterieceller,≤ 3 x 10 ⁸ jästceller,< 200mg vävnad
• Typiskt RIN:> 9
• Elueringsvolym: 500 μL
• Bindningskapacitet: 700 μg
• Förberedelsetid: 80 min./4 förberedelser
• Format: midi spin-kolonn Total RNA-isolering från odlade celler, vävnad, bakterier, jäst, prover lagrade i RNAlater och RNA-sanering av reaktionsblandningar.