OPTIZYME™ AloI, Fisher BioReagents™

5'...^ ₇ (N) GAAC (N) ₆ TCC (N) _12-13 ^...3'
3'...^ _12-13 (N) CTTG (N) ₆ AGG (N) ₇ ^...5'

Levereras med: 10X OPTIZYME Buffert 5
Villkor för 100 % aktivitet:

• 1X OPTIZYME Buffert 5: 10 mM Tris-HCl (pH 8,5 vid 37 °C), 10 mM _MgCl2 , 100 mM KCl och 0,1 mg/ml BSA
• Inkubera vid 30 °C

• Buffert 1: 0 - 20 %
• Buffert 2: 0 - 20 %
• Buffert 3: 0 - 20 %
• Buffert 4: 20 - 50 %
• Buffert 5: 100 %

• 10 mM Tris-HCl (pH 7,4 vid 25 °C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA och 50 % (v/v) glycerol

• Inkubation vid 37 °C resulterar i 20 % aktivitet.
• AloI producerar dubbelsträngade snitt på båda sidor från den avbrutna igenkänningsplatsen. Dess unika egenskap är en degenererad klyvningspunkt på 3-sidan av igenkänningssekvensen (12 eller 13 nukleotider bort).
• Närvaron av S-adenosylmetionin i reaktionsblandningen resulterar i ofullständig klyvning med AloI.
• Mer än 10-faldig översmältning med AloI kan resultera i stjärnaktivitet.
• AloI kan förbli associerad med det klyvda DNA:t. Detta kan orsaka förskjutning av DNA-band under elektrofores. För att undvika atypiska DNA-bandmönster, använd 6X DNA Loading Dye& SDS-lösning för provberedning eller värm det digererade DNA:t i närvaro av SDS före elektrofores.

• 5'...GAAC(N) ₄ Gm6A TCC...3'

• 5'...GAAC(N) ₆ TCm5CW GG...3'

• 5'...m5C GAAC(N) ₆ TCC...3'

• 5'...GAAC(N) ₆ TCm5C G...3'

• 5'...GAAm5C G(N) ₅ TCC...3'