MP Biomedicals™ Peroxidas, MP Biomedicals™

Pepparrotsperoxidas (HRP) är en enkelkedjig polypeptid som innehåller fyra disulfidbryggor. Det finns minst sju isozymer. När det inkuberas med ett substrat, producerar pepparrotsperoxidas ett färgat, fluorimetriskt eller luminescerande derivat av den märkta molekylen, vilket möjliggör kvantifiering. Det är ett glykoprotein som innehåller 18% kolhydrater.

• Kolhydratsammansättningen består av galaktos, arabinos, xylos, fukos, mannos, mannosamin och galaktosamin, beroende på det specifika isozymet
• Dess molekylvikt (∼ 44 kDa) inkluderar polypeptidkedjan (33 890 Dalton), hemin plus Ca2+ (∼ 700 Dalton) och kolhydrater (∼ 9 400 Dalton)
• Pepparrotsperoxidas har visat sig minska nivån av hämning något i en cydAB-mutant
• Kända inhibitorer är natriumazid, cyanid, L-cystin, dikromat, etylentiourea, hydroxylamin, sulfid, vanadat, p-aminobensoesyra och Cd2+, Co2+, Cu2+, Fe3+, Mn2+, Ni2+ och Pb2+-joner

HRP används i biokemiapplikationer. Det används för att förstärka en svag signal och öka detekterbarheten av en målmolekyl, såsom ett protein.

• Det används vanligtvis för att bestämma mängder glukos och peroxider i lösning. Det har använts i en aspergillus fumigatus snabb känslighetsanalys
• Kan konjugeras till antikroppar med flera olika metoder
• Konjugationsmetoder inkluderar glutaraldehyd, perjodatoxidation, genom disulfidbindningar och även via amino- och tiolriktade tvärbindare
• Det är den mest önskade märkningen för antikroppar, eftersom den är den minsta och mest stabila av de tre mest populära enzymmärkningarna (HRP,β -galaktosidas och alkaliskt fosfatas) och dess glykosylering leder till lägre ospecifik bindning
• En översikt av glutaraldehyd- och perjodatkonjugationsmetoder har publicerats
• HRP-märkta immunglobuliner används som prober för demonstration av vävnadsantigener och i enzymimmunanalys (EIA ) system för bestämning av lösliga och olösliga antigener
• Det är också användbart för att spåra neurala anslutningar, inklusive motorisk och sensorisk innervation av perifera organ, och anslutningar av perifera nerver, ganglier och individuella dorsalrötter.