Invitrogen™ Phalloidin-märkningssonder

En mängd olika phalloidinkonjugater för filamentös (F-aktin) färgning finns tillgängliga, inklusive fluorescerande Alexa Fluor och Alexa Fluor Plus-falloidiner, tillsammans med falloidiner konjugerade till klassiska fluorescerande färgämnen såsom BODIPY fluorescein och rodamin. Phalloidinfärgning är spektralt kompatibel med andra fluorescerande färgämnen som används i cellanalys såsom GFP/RFP, Qdot nanokristaller och andra Alexa Fluor konjugater och antikroppar. Biotin‐XX Phalloidin kan användas för att visualisera aktinfilament via fluorescerande streptavidintaggar eller standardenzymmedierade avidin/streptavidintekniker såsom elektronmikroskopi. Omärkt falloidin finns tillgängligt för användning som kontroll för att blockera F-aktinfärgning eller för att främja polymerisering.

Phalloidinkonjugater binder till både stora och små aktinfilament med liknande affinitet i en 1:1-støkiometri mellan fallotoxin- och aktinunderenheter. De binder inte G-aktinmonomerer.

Alexa Fluor och Alexa Fluor Plus falloidinkonjugater för F-aktinfärgning

Fluorescerande Alexa Fluor färgkonjugater av falloidin är populära F-aktinfärger som erbjuder färgval över hela spektralspektrumet. Dessa phalloidinkonjugerade ger forskarna fluorescerande sonder som är överlägsna i ljusstyrka och fotostabilitet jämfört med andra spektralt liknande konjugater.

Alexa Fluor Dessutom behåller phalloidinkonjugater samma specificitet för aktin men erbjuder 3–5 gånger högre känslighet och ljusstyrka jämfört med motsvarande Alexa Fluor falloidinkonjugat. Denna ökade ljusstyrka är fördelaktig för att utmana F-aktinavbildning, såsom superupplösta mikroskopimetoder SIM och STORM, samt för tillförlitlig färgning av aktinspänningsfibrer.

Egenskaper hos falloidinprober

• Hög specificitet—binder selektivt till F-aktin, vilket möjliggör exakt märkning av aktinfilament i fixerade celler och kryokonserverade vävnader
• Stark affinitet—nanomolär bindningsaffinitet för F-aktin, vilket säkerställer stabil och pålitlig aktinfärgning
• Omfattande fluorescerande konjugerade alternativ—över tjugo konjugerade varianter av falloidin
• Kompatibilitet med fixerade prover—som vanligtvis används med fixerade celler och vävnader, vilket gör dem lämpliga för aktinfärgning i detaljerade strukturella studier, immunofluorescensfärgning och IHC-applikationer
• Multiplexingförmåga—Den breda tillgången på phalloidinkonjugater möjliggör deras användning i kombination med andra fluorescerande prober och antikroppar för multiplexavbildning. Biotinylerat falloidin kan användas i nedströms streptavidinsteg.
• Kvantitativ analys—kan användas för kvantitativ analys av F-aktinfördelning och densitet inom celler, vilket hjälper till vid studiet av cytoskelettdynamik. Det omärkta falloidinet kan titreras som en kontroll.
• Enkel användning—och betsning är enkel och snabb
• Utmärkt stabilitet—visar god fotostabilitet, vilket är avgörande för långvariga bildsessioner och timelapse-studier
• Bred tillämpning—används för en rad tillämpningar, inklusive studier av cellmorfologi, rörlighet och läkemedels effekter på aktincytoskelettet