Invitrogen™ pHrodo™ Röd och grön dextran, 10 000 MW, för endocytos

pHrodo Röd dextran (kat.nr. P10361) är ett överlägset alternativ till andra fluorescerande dextrankonjugat (t.ex. BCECF och tetrametylrhodamin [TRITC]) för levande cellavbildning av endocytos, den process varigenom plasmamembranet knoppar för att bilda membranbundna vesiklar i cellen som sedan transporteras till olika destinationer (endosomer). pHrodo Red Dextran har pH-känsliga fluorescensexcitations-/emissionsspektra på 560/585 nm, och dess fluorescensemission ökar i intensitet med ökande surhet. Denna ökning är särskilt dramatisk i intervallet pH 5 –8, vilket vanligtvis ses i endocytiska vesiklar. pHrodo Röd dextran är väsentligen mörk i den extracellulära miljön; vid internalisering framkallar emellertid dextrankonjugatet en ljus, röd-fluorescerande signal i endosomernas sura miljö. pHrodo Red Dextran kan också multiplexeras med en mängd olika blå, gröna och långt röda färgämnen och reportrar som GFP, Fuo-4, calcein, NucBlue , CellEvent Caspase 3/7 grön, Mitosox grön, och Mitotracker Deep Red, bland många andra.

pHrodo Green Dextran (kat. nr. P35368), som pHrodo Red Dextran, erbjuder snabba och exakta resultat för endocytos- och fagocytosanalyser i levande celler. pHrodo Gröna konjugat är icke-fluorescerande utanför cellen vid neutralt pH, men fluorescerar ljust grönt vid sura pH-intervall, såsom de i endosomer och lysosomer. De pHrodo Grönt färgämne kan multiplexeras med en mängd olika blå, röda och långt röda färgreportrar som Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 Röd, NucBlue , RFP:er och Mitotracker Deep Red, bland många andra. pHrodo Grönt Dextran 10 000 MW konjugat kan användas i cellavbildning, screening med högt innehåll, screening med hög genomströmning och flödestillämpningar. För ett bredare urval av kompatibla färgämnen, se Cell Staining Tool eller SpectraViewer.

Nyckelapplikationer som använder märkta dextrans:
Det finns många citat som beskriver användningen av märkta dextraner. Några av de vanligaste användningsområdena inkluderar följande:
•Neuronal spårning (anterograd och retrograd) i levande celler
• Spårning av cellhärkomst i levande celler
• Neuroanatomisk spårning
• Undersöka intercellulär kommunikation (t.ex. i gap junctions, under sårläkning och under embryonal utveckling)
• Undersöker vaskulär permeabilitet och blod-hjärnbarriärens integritet
• Spårning av endocytos
• Övervakning av försurning (vissa dextran-färgämneskonjugat är pH-känsliga)
• Studera de hydrodynamiska egenskaperna hos den cytoplasmatiska matrisen.

Höga tillverkningsstandarder
Vi erbjuder mer än 50 fluorescerande och biotinylerade dextrankonjugat i flera molekylviktsintervall. Dextraner är hydrofila polysackarider som kännetecknas av deras måttliga till höga molekylvikt, goda vattenlöslighet och låga toxicitet. De uppvisar också i allmänhet låg immunogenitet. Dextraner är biologiskt inerta på grund av deras ovanliga poly-(α -D-1,6-glukos), vilket gör dem resistenta mot klyvning av de flesta endogena cellulära glykosidaser.

I de flesta fall är våra fluorescerande dextraner mycket ljusare och har högre negativ laddning än dextraner tillgängliga från andra källor. Dessutom använder vi rigorösa metoder för att ta bort så mycket okonjugerat färgämne som möjligt, och analyserar sedan våra dextrankonjugat med tunnskiktskromatografi för att säkerställa frånvaron av föroreningar med låg molekylvikt.

Brett urval av substituenter och molekylvikter
Våra dextraner är konjugerade till biotin eller en mängd olika fluoroforer, inklusive sju av våra Alexa Fluor färgämnen och är tillgängliga i dessa nominella molekylvikter (MW): 3 000; 10 000; 40 000; 70 000; 500 000; och 2 000 000 dalton.