Invitrogen™ PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssats

De PichiaPink™ Secretion Optimization Kit är ett nytt rekombinant proteinuttryckssystem baserat på jästen Pichia pastoris . De PichiaPink™ Secretion Optimization Kit ger dig bekväm och kostnadseffektiv bioproduktion från skakkolv till 1000-liters produktion av ditt rekombinanta protein. De PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssats kommer med våra nya Pichia- stammar, pPINK-HC- och pPINK-LC-vektorerna och sekretionssignalsekvenser för produktion av ditt protein.

• Skaffa ett komplett kit för att komma igång med proteinproduktion i Pichia pastoris .
• Avskärma dina Pichia -transformanter snabbt genom auxotrofi och färgval.
• Minska proteinnedbrytningen med Pichia pastoris -stammar som saknar proteas.
• Optimera proteinutsöndringen med en av 8 utsöndringssignalsekvenser.

De PichiaPink™ Secretion Optimization Kit kommer med:

• PichiaPink™ Vector Kit (kat. nr. A11152)
• PichiaPink™ Sekretionssignaluppsättning (A11155)
• PichiaPink™ Expressionstöjningssats (A11154)
• PichiaPink™ Media Kit (A11156)

Ett nytt sätt att screena Pichia-transformanter

De PichiaPink™ Secretion Optimization Kit använder adenin-auxotrofi för att välja för Pichia -transformanter. De PichiaPink™ stammar har genotypen ade2 och kräver komplementering med ADE2- genen för att växa utan adenin. Användning av en auxotrof markör gör det också lättare att underhålla transformanter. Inga antibiotika krävs för att underhålla dina transformanter.

Dessutom kan du screena för Pichia -transformanter efter färg. Det oförvandlade PichiaPink™ stammar uppträder som rosa kolonier medan de transformeras PichiaPink™ stammar uppträder som vita kolonier (fig 1).

Nya uttrycksvektorer för Pichia

De PichiaPink™ Secretion Optimization Kit kommer med den nya PichiaPink™ Vektor Kit. Kitet innehåller två vektorer, pPINK-LC och pPINK-HC. pPINK-vektorerna är uppbyggda kring ADE2- genen för att komplettera de ade2 -defekta Pichia- stammarna. Båda vektorerna använder den metanol-inducerade AOX1- promotorn för att uttrycka ditt protein. pPINK-LC integreras med lågt antal kopior i Pichia- genomet medan pPINK-HC-vektorn integreras med högt antal kopior.

Både pPINK-LC- och pPINK-HC-vektorerna är kompatibla med PichiaPink™ Sekretsignaluppsättning. Med hjälp av en 3-vägs ligering kan du lägga till en av 8 sekretionssekvenser till din gen. Notera: pPINK-vektorerna uttrycker proteiner intracellulärt som standard.

Både PichiaPink™ Vector Kit (kat. nr. A11152) och PichiaPink™ Sekretionssignalset (A11155) kan beställas separat för att fylla på PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssats.

Håll dina proteiner intakta

De PichiaPink™ Secretion Optimization Kit kommer med PichiaPink™ Uttrycksstamuppsättning. Detta set innehåller de 4 Pichia pastoris- stammarna för användning med PichiaPink™ Uttryckssystem. Alla fyra stammarna har genotypen ade2 . Dessutom inkluderar 3 stammar knockouts i 2 proteasgener. Proteasbriststammar minskar behovet av proteashämmare när du odlar dina celler och förbättrar utbytet av ditt protein. Testa en enkel proteas knockout eller dubbel proteas knockout för att hitta den som fungerar bäst för dig.

Du kan beställa PichiaPink™ Expressionstöjningsset (kat. nr. A11154) separat för att fylla på PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssats.

Mediapåsar för att komma igång

De PichiaPink™ Media Kit är en uppsättning praktiska förpackade mediapåsar för användning med PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssats. De PichiaPink™ Media Kit innehåller media som behövs för att växa PichiaPink™ stammar från frysta bestånd till kulturer redo för transformation och urval. Du kan beställa PichiaPink™ Media Kit (kat. nr. A11156) separat för att fylla på PichiaPink™ Sekretionsoptimeringssats.

Varför välja PichiaPink™ Yeast Expression System?

De PichiaPink™ Yeast Expression System är baserat på jästen Pichia pastoris . Fördelarna med Pichia pastoris inkluderar snabb tillväxt, väldefinierad genetisk bakgrund, enkel medieformulering och enkel hantering. I över 30 år har Pichia pastoris använts av laboratorier runt om i världen för att producera hundratals olika proteiner från många arter inklusive människor (Ref 1, 2). De PichiaPink™ Yeast Expression System möjliggör bekväm och kostnadseffektiv proteinproduktion från små till stora skalor.

För information om hur du skaffar en kommersiell användningslicens för PichiaPink ™Yeast Expression System, vänligen fråga på outlicensing@lifetech.com.

Referenser

1. Cereghino JL, Cregg JM. Heterologt proteinuttryck i den metylotrofa jästen Pichia pastoris. FEMS Microbiol Rev. 2000 Jan;24(1):45-66. [PubMed]

2. Cereghino GP Cereghino JL, Ilgen C, Cregg JM. Produktion av rekombinanta proteiner i fermentorkulturer av jästen Pichia pastoris. Curr Opin Biotechnol. 2002 aug;13(4):329-32. [PubMed]