Thermo Scientific™ Pierce™ Anti-c-Myc Agarose

Thermo Scientific Pierce Anti-c-Myc Agarose är ett immunprecipitationsharts med hög affinitet, idealiskt för rening av rekombinanta c-Myc-märkta proteiner som uttrycks i mänskliga in vitro-uttryckssystem samt bakteriella och däggdjurscelllysater.

Anti-c-Myc-antikroppen som används för att tillverka Pierce Anti-c-Myc Agarose är en mycket specifik mus IgG1 monoklonal antikropp (klon 9E10) som känner igen c-Myc-epitopetiketten (EQKLISEEDL) som härstammar från människans c-myc-onkogen (p62 c-myc). Stödet är korslänkad 4% pärlbeadad agarose. Detta anti-c-Myc-affinitetsharts kan packas i gravitationsreningskolonner, spinreningskolonner eller patroner för FPLC instrument för att rena c-Myc-fusionsproteiner som uttrycks i bakterie- eller däggdjursceller.

• Specifik  – högspecifik anti-c-Myc monoklonala antikropp (klon 9E10) möjliggör hög avkastning och hög renhet för immunutfällning
• Skalbart  – , tillgängligt i 2 och 10 ml resinförpackningar för att möjliggöra större reningar eller immunutfällningar
• Versatile  – kan användas i spinn- eller gravitationskolonner samt i FPLC patroner
• Bekväma  – reagenser för att eluera och upptäcka c-Myc-märkta fusionsproteiner finns tillgängliga separat

• Rening av c-Myc-fusionsproteiner uttryckta i Pierce Human In Vitro Translation Kits
• Storskalig rening av rekombinanta c-Myc-märkta proteiner
• Högkapacitetsanrikning av fusionsproteiner och interagerande partners
• IP- och co-IP-experiment (som med Pierce c-Myc-Tag IP/co-IP Kit)

Pierce Anti-c-Myc Agarose består av en mycket specifik monoklonal anti-c-Myc-antikropp som är kovalent immobiliserad på ett korsbundet 4% pärlbefordrat agarosestöd. Produkten levereras som en 25 % slurry. Vid inkubation med ett prov fångas ett c-Myc-märkt fusionsprotein på agarospärlorna. Efter enkla tvättsteg kan det märkta proteinet enkelt elueras från hartset med 0,1 mil. glycin (pH 2,0–2,8), 3M NaSCN eller 50 mM NaOH beroende på den nedströms appliceringen av det renade proteinet. För eluering av högfunktionella proteiner kan Pierce c-Myc-peptid också användas för att eluera det c-Myc-märkta proteinet. Anti-c-Myc-antikroppar kan användas för att upptäcka närvaron av det märkta proteinet med Western blot.

I experiment med ett c-Myc-märkt fusionsprotein (26 till 29 kDa) gav hartset en bindningskapacitet på 102 till 144 nmol protein per ml sedimenterat harts. Eluationskapaciteten var minst 18 till 19 nmol per ml sedimenterat harts med 0,1 M glycin, pH 2,8. Bindnings- och eluationskapacitet varierar beroende på c-Myc-fusionsproteinet och metoden för eluering.