Thermo Scientific™ Pierce™ Anti-c-Myc Agarose

Thermo Scientific Pierce Anti-c-Myc Agarose är ett immunoutfällningsharts med hög affinitet som är idealiskt för rening av rekombinanta c-Myc-märkta proteiner uttryckta i humana in vitro-expressionssystem och bakteriella och däggdjurscellysat.

Anti-c-Myc-antikroppen som används för att tillverka Pierce Anti-c-Myc Agarose är en mycket specifik mus IgG1 monoklonal antikropp (klon 9E10) som känner igen c-Myc-epitoptaggen (EQKLISEEDL) härledd från den humana c-myc-onkogenen (p62 c-myc). Bäraren är tvärbunden 4% pärlformad agaros. Detta anti-c-Myc affinitetsharts kan packas i gravitationsreningskolonner, spinnreningskolonner eller patroner för FPLC instrument för att rena c-Myc-fusionsproteiner uttryckta i bakterie- eller däggdjursceller.

• Specifik – mycket specifik anti-c-Myc monoklonal antikropp (klon 9E10) möjliggör högt utbyte och hög renhet för immunoutfällning
• Skalbar – tillgänglig i 2 och 10 ml hartsförpackningsstorlekar för att möjliggöra större reningar eller immunutfällningar
• Mångsidig – kan användas i spinn- eller gravitationskolonner såväl som i FPLC patroner
• Bekväm – reagenser för att eluera och detektera c-Myc-märkta fusionsproteiner finns tillgängliga separat

• Rening av c-Myc-fusionsproteiner uttryckta i Pierce Human In Vitro Translation Kit
• Storskalig rening av rekombinanta c-Myc-märkta proteiner
• Högkapacitetsanrikning av fusionsproteiner och interagerande partners
• IP- och co-IP-experiment (som med Pierce c-Myc-Tag IP/co-IP Kit)

Pierce Anti-c-Myc Agarose består av en mycket specifik monoklonal anti-c-Myc-antikropp som är kovalent immobiliserad på en tvärbunden 4 % pärlformad agarosbärare. Produkten levereras som 25 % slurry. Vid inkubation med ett prov fångas c-Myc-märkt fusionsprotein på agarospärlorna. Efter enkla tvättsteg elueras det märkta proteinet lätt från hartset med 0,1 M glycin (pH 2,0-2,8), 3M NaSCN eller 50 mM NaOH beroende på nedströmsapplikationen av det renade proteinet. För eluering av högfunktionella proteiner kan Pierce c-Myc-peptid också användas för att eluera det c-Myc-märkta proteinet. Anti-c-Myc-antikropp kan användas för att detektera närvaron av det märkta proteinet genom Western blöt.

I experiment med ett c-Myc-märkt fusionsprotein (26 till 29 kDa) gav hartset en bindningskapacitet på 102 till 144 nmol protein per ml sedimenterat harts. Elueringskapaciteten var minst 18 till 19 nmol per ml sedimenterat harts med användning av 0,1 M glycin, pH 2,8. Bindnings- och elueringskapaciteten kommer att variera beroende på c-Myc-fusionsproteinet och elueringsmetoden.