Läs mer
Thermo Scientific™ Pierce™ Dilution-Free™ Snabbt guld BCA Proteinanalys
Handla allt Thermo Scientific ProdukterBeskrivning
Pierce Dilution-Free Rapid Gold BCA Protein Assay Kit är ett lätt, snabbt och exakt test optimerat för att bestämma total proteinkoncentration. Det är detergent-kompatibelt och har ett 5 gånger bredare dynamiskt omfång än traditionella proteinassays på 0,02 – 10 mg/ml. Detta breda dynamiska omfång eliminerar behovet av att späda ut de flesta prover för att få dem inom analysens räckvidd.
Dessutom Dilution-Free levereras Rapid Gold BCA Protein Assay med en uppsättning av sju förspädda BSA-proteinstandarder förpackade i en multikanalspipettvänlig tubestrip, så inga serielt utspädningssystem krävs. Tubestripen inkluderar ett enda tomt rör som gör det möjligt för användare att lägga till sin egen provbuffert för att möjliggöra subtraktion av blank. Tubestrip-hållaren Dilution-Free (Cat. Nr. A57184) möjliggör enkel hantering på bänken.
Funktionerna Dilution-Free i Rapid Gold BCA Protein Assay Kit inkluderar:
- Utspädningsfritt – eliminerar behovet av prov- och standardkurvutspädningar, vilket minskar förberedelsetiden med upp till 80 %
- Kort analystid – fem minuter, rumstemperaturreaktion
- Brett analysområde – och linjärt arbetsområde för BSA på 20 till 10 000 μg/ml
- Uniform – uppvisar liknande protein-till-protein-variation som traditionell BCA proteinanalys och mindre protein-till-protein-variation än färgbindande proteinanalysmetoder (Bradford)
- Kompatibla–, opåverkade av typiska koncentrationer av de flesta joniska och icke-joniska detergenter
- Kolorimetrisk – optimal absorption vid 480 nm
- Noggrann 2 – gånger mer exakt än Bradford-analyser
Pierce Dilution-Free Rapid Gold BCA Protein Assay Kit använder samma kopparkelaterande teknik som den välkända traditionella Pierce BCA proteinanalysen och ger jämförbar noggrannhet, men med fem minuters rumstemperatur och uppmätt vid 480 nm. Denna förbättring eliminerar behovet av att utföra serie- eller provutspädningar, genomgå en lång inkubationsperiod eller utsätta proverna för förhöjda temperaturer vilket ger snabbare tid till resultat.
Den traditionella BCA proteinanalysen är en allmänt använd och accepterad proteinanalys, som litar på för sin mycket noggranna bestämning av proteinkoncentration och kompatibilitet med de flesta provtyper som förekommer i proteinforskning. För att framkalla proverna i detta traditionella protokoll måste man dock antingen värma reaktionen vid 37 °C i 30 minuter eller tillåta rumstemperatur i två timmar. Dilution-Free Rapid Gold BCA Protein Assay behåller de viktigaste egenskaperna hos den traditionella BCA analysen men möjliggör en snabb tid och rumstemperatur som motsvarar färgbindningsmetoder.
Dilution-Free Rapid Gold BCA Assay kan användas för att bedöma avkastning i hela celllysater och affinitetskolumnfraktioner, samt för att övervaka proteinkontaminering i industriella tillämpningar. Liknande det traditionella BCA assay Dilution-Free påverkas Rapid Gold BCA Assay mycket mindre än färgbindningsmetoder av proteinsammansättningsskillnader, vilket ger låg variation mellan proteiner.
Hur Rapid Gold BCA Protein Assay upptäcker Dilution-Free protein
Dilution-Free Rapid Gold BCA Protein Assay använder samma kopparreduktionsmetod som den traditionella BCA proteinanalys med en unik kopparkelator. Analysen kombinerar den välkända reduktionen av Cu2+ till Cu1+ med protein i ett alkaliskt medium med den mycket känsliga och selektiva kolorimetriska detektionen av kopparkatjonen (Cu1+) av den proprietära kelatorn. Det första steget är kelationen av koppar med protein i en alkalisk miljö för att bilda ett ljusgrönt komplex. I denna reaktion, känd som biuretreaktionen, bildar peptider som innehåller tre eller fler aminosyrarester ett färgat kelatkomplex med kuperianjoner i en alkalisk miljö som innehåller natriumkaliumtarrat.
I det andra steget av färgutvecklingsreaktionen Dilution-Free reagerar Rapid Gold-kelatorn BCA med den reducerade (kopperiga) katjonen som bildades i steg ett. Den intensiva guldfärgade reaktionsprodukten uppstår genom kelationen av två molekyler med BCA en kopparjon. BCA/kopparkomplexet är vattenlösligt och uppvisar en stark linjär absorption vid 480 nm med ökande proteinkoncentrationer. Komplexet är ungefär 100 gånger känsligare (nedre detektionsgränsen) än den blekgröna färgen i den första reaktionen.
Reaktionen som leder till färgbildningen påverkas starkt av fyra aminosyrarester (cystein, cystin, tyrosin och tryptofan) i proteinets aminosyrasekvens. Till skillnad från färgbindningsmetoderna Coomassie (dvs. Bradford) bidrar dock den universella peptidryggraden också till färgbildningen och hjälper till att minimera variationer orsakade av skillnader i proteinsammansättning.
Kompatibilitet med Dilution-Free Rapid Gold BCA Protein Assay
Vissa ämnen är kända för att störa Dilution-Free Rapid Gold BCA Protein Assay, inklusive de med reducerande potential, kelaterande medel och starka syror eller baser. Eftersom de är kända för att störa proteinuppskattningen vid även små koncentrationer, undvik följande ämnen som komponenter i provbufferten:
- Askorbinsyra
- EGTA
- Järn
- Oren sackaros
- Katekolaminer
- Oren glycerol
- Lipider
- Tryptofan
- Kreatinin
- Väteperoxid
- Melibios
- Tyrosin
- Cystein
- Hydrazider
- Fenolröd
- Urinsyra
- TCEP
- Thimerosal
- 2-merkaptotanol
Pierce Dilution-Free Rörstripshållare
Pierce Dilution-Free Tubestrip Holder är ett återanvändbart skumstativ för användning med Pierce Dilution-Free BSA Protein Standards och ingår i 20 ml teststorleken i Pierce Dilution-Free Rapid Gold BCA Protein Assay Kit. Den finns också tillgänglig för försäljning separat. Proteinstandardkoncentrationer är tryckta på Tubestrip Holder för enkel referens och pipettering på bänken.
Specifikationer
Specifikationer
| Analysintervall | 20 till 10 000μ g/ml |
| Innehåll och lagring | Tillräckligt för: 2 400 mikroplattanalyser eller 250 provrörsanalyser • Dilution-Free Snabbt guld BCA Reagens A, 2 x 250 ml • Dilution-Free Snabbt guld BCA Reagens B, 10 ml • Dilution-Free BSA-proteinstandarder (0,2-10 mg/ml), 2 x 1 ml 8-kanals rörstrip Förvara i kylskåp (2 °C till 8 °C). |
| Detektionsmetod | Kolorimetrisk |
| Produktlinje | Pierce Dilution-Free |
| Produkttyp | Proteinkvantifieringsanalys |
| Specificitet | Inte målspecifikt |
| För användning med (applikation) | Lösningsbaserad detektion, absorption |
| För användning med (utrustning) | Spektrofotometer, mikroplattläsare |
| Kvantitet | 500 mL |
| Frakt skick | Våt is |
Endast för forskning.
Genom att klicka på Skicka bekräftar du att du kan bli kontaktad av Fisher Scientific angående feedbacken du har lämnat i detta formulär. Vi kommer inte att dela din information för andra ändamål. All kontaktinformation som tillhandahålls ska också underhållas i enlighet med vår Sekretesspolicy.