Thermo Scientific™ Pierce™ Fluorescens Biotin Kvantifiering Kit

Denna mikroplattbaserade biotinanalys är lätt att utföra genom att lägga till den medföljande fluorescerande reportern till de biotinylerade proverna och utspädda biocytinstandarder. Avidinet fluorescerar när den svagt interagerande HABA (4'-hydroxiazobensen-2-karboxylsyra) undanträngs av biotinet. Mängden biotin bestäms genom att jämföra provets fluorescens med biocytinstandardkurvan. Denna analys kräver mycket mindre provvolym än den kolorimetriska HABA-analysen på mikroplattor och är mycket känsligare.

Höjdpunkter:

• Snabb— kräver endast 5 minuters inkubation
• Ekonomisk— kräver endast μ10 L prov (ca 750 ng biotinylerat IgG)
• Känslig— linjärt arbetsområde på 10 till 60 pikomol biotin

Innehåller:

Analysbuffert, HABA-avidin fluorescerande reporterlösning och biocytinkontroll

Krävs

Svart ogenomskinlig mikroplatta med 96 brunnar och en fluorescensplattaläsare (excitation 494nm; emission 520nm)

Produktinformation:

Den mycket specifika interaktionen av avidin eller streptavidin med biotin är grunden för många renings- och detektionssystem. Att kvantifiera graden av biotinylering är nödvändigt för att bedöma om ett biotinmärkningsförfarande var framgångsrikt och vilken mängd biotinylerad molekyl som ska användas för en specifik tillämpning. HABA (4'-hydroxiazobensen-2-karboxylsyra) är ett färgämne som interagerar svagt med avidin och används vanligtvis i en kolorimetrisk analys för att snabbt uppskatta förhållandet mellan biotin och protein. Fluorescensbiotinkvantifieringssatsen använder också HABA-färgämne men är mer känslig och exakt. En förblandning av fluorescerande avidin med HABA (DyLight Reporter) tillsätts till lösningen som innehåller det biotinylerade provet. På grund av dess högre affinitet för avidin tränger biotin undan HABA, vilket gör att avidinet kan fluorescera. Mängden biotin mäts i en mikroplatta genom att jämföra fluorescensen med en standardkurva för biocytin. Fluorescensbiotinkvantifieringssatsen kräver endast 10 μL prov. Däremot kräver den traditionella kolorimetriska metoden μ100 L prov, och en annan ledande leverantörs fluorescerande analyskit kräver 50 μL prov. Vårt kit är mer exakt än den andra leverantörens fluorescerande biotinanalys.