Thermo Scientific™ Pierce™ Proteinkoncentratorer PES, 3K eller 5K MWCO, 0,5 –100 ml

För protein och andra biologiska prover, såsom nukleinsyror, med en 3K och 5K MWCO, erbjuder Pierce Protein Concentrators PES snabb proteinkoncentration, utmärkt provåtervinning och instrumentkompatibilitet. Dessa centrifugalenheter har ett högflödespolyetersulfon (PES)-membran för koncentration, avsaltning och buffertbyte av biologiska prover. Dessa koncentratorer har MWCOs på 3K och 5K och kan användas för att bearbeta provvolymer på 0,5 –100 ml.

Funktioner hos 3K och 5K MWCO Protein Concentrators PES inkluderar:
• Snabb proteinkoncentration —provkoncentration på 10 till 30 gånger kan uppnås på 15 eller färre minuter
•Utmärkt proteinåtervinning —typisk proteinåtervinning är> 90 % (när provmassan är minst två gånger större än den angivna MWCO)
•Instrumentkompatibilitet en —standardmikrocentrifug med rotorer med svängande eller fast vinkel (förutom 88534) kan användas; prov kan samlas in och återvinnas utan inverterad spinning
•Mångsidigt —enkelt utföra provkoncentration, diafiltrering eller buffertutbyte av biologiska prover

För enkel identifiering etsas MWCO-värdet på sidan av varje enhet. För att hjälpa till med provtillsats och återvinning finns ett tydligt fönster med graderingar på sidan av varje enhet, vilket möjliggör visuell bestämning av retentatvolymen. Den vertikala designen av membranet tillåter höga flödeshastigheter, låg ospecifik bindning och försumbar proteinaggregation på membranet, vilket ger tillförlitliga och konsekventa resultat för bearbetning av provvolymer mellan 0,5 och 100 ml. Typisk proteinåtervinning är 90 % när massan av proteinerna i provet är minst två gånger större än MWCO för den använda enheten. Till exempel när man koncentrerar IgG (MW∼ 150 KDa) prover, använd 5K, 10K, 30K eller 50K MWCO-koncentratorer. Slutliga provkoncentrationer på 10 till 30 gånger kan uppnås inom 15 minuter.

Protein Concentrators PES-applikationer
• Proteinkoncentration av vävnadsodlingsmedia, antiserum eller monoklonala antikroppspreparat
• Koncentration av proteintoppar efter gelpermeationskromatografi
• Avlägsnande av icke inkorporerad märkning efter proteinmodifieringsreaktioner
• Koncentration och avsaltning/buffertutbyte efter eluering av protein från jonbyte, hydrofob interaktion (HIC), metallkelat eller affinitetskromatografikolonner
• Separation av molekyler av olika storlekar Pierce Protein Concentrators PES innehåller

ett membran som är klassat för att hålla kvar molekyler med en molekylvikt som är minst två gånger högre än MWCO-klassificeringen för PES-membranet i enheten. Minskad återhämtning kan uppstå vid användning av en koncentrator med molekyler som är mindre än den rekommenderade massan. Proteinåtervinningen kommer att variera beroende på det specifika proteinet i provet och dess startkoncentration.

Dödstoppsvolymen för 0,5 mL, 2 6 mL, –5 20 –mL och 20 100 mL –koncentratorerna är cirka 15μ L, 30μ L, 50μ L och 350μ L, respektive.

Att uppnå> 90 % återvinning av protein med 0,5 ml koncentratorer, den lägsta proteinprovkoncentrationen bör vara 0,05 mg/ml. För alla andra koncentratorer bör den lägsta proteinprovkoncentrationen vara 0,1 mg/ml.

Optimala centrifuger och hastigheter
0,5 ml koncentratorerna kan användas effektivt vid en maximal centrifugalkraft på 15 000x g med endast en centrifug med fast vinkel.

För 2-6 ml koncentratorer kan centrifugmodeller med svängande hink eller fast vinkel användas. Svängande hinkcentrifuger som kan generera 2 000– 4 000x g och en maximal centrifugalkraft på 4 000x g rekommenderas. Med centrifuger med fast vinkel, modeller som kan generera 5 000– 10 000x g och en maximal centrifugalkraft på 8 000x g rekommenderas.

För 5-20 mL volymkoncentratorer kan centrifugmodeller med svängande hink eller fast vinkel användas. Swinging-bucket-centrifuger som kan generera 2 000– 5 000x g och en maximal centrifugalkraft på 4 000x g rekommenderas. Med centrifuger med fast vinkel, modeller som kan generera 5 000– 8 000x g och en maximal centrifugalkraft på 6 000x g rekommenderas.

För 20-100 ml koncentratorer, endast centrifuger med svängande hink som kan generera 1 000– 2 000x g rekommenderas. Använd en maximal centrifugalkraft på 2 000x g. Dessa koncentratorer rekommenderas inte för användning i rotorer med fast vinkel.

Centrifugalkraft, temperatur och provvolym, koncentration och viskositet kommer att påverka filtreringshastigheten och kräver optimering av tiden för varje applikation.