Thermo Scientific™ Pierce™ Rekombinant protein A

Använda Thermo Scientific Pierce Rekombinant Protein A för att undersöka och detektera kanin- och humanantikroppar, särskilt IgG-isotyper, i Western blotting, ELISA , IHC och andra immunanalysprotokoll.

Egenskaper hos rekombinant protein A inkluderar:

• Innehåller fyra Fc-bindande domäner per protein
• Bättre än Protein G för polyklonalt IgG från kanin-, gris-, hund- och kattserum
• Sämre än protein G för mus IgG1, humant IgG3 och råtta, get och ko antikroppar

Protein A är en cellväggskomponent som produceras av flera stammar av Staphylococcus aureus som består av en enda polypeptidkedja och innehåller lite eller inga kolhydrater. Rekombinant protein A produceras i E. coli och fungerar i huvudsak på samma sätt som naturligt protein A. Protein A-molekylen innehåller fyra bindningsställen med hög affinitet som kan interagera med Fc-regionen från IgG från flera arter inklusive människa och kanin. Optimal bindning sker vid pH 8,2, även om bindning också är effektiv vid neutrala eller fysiologiska förhållanden (pH 7,0 till 7,6).

Egenskaper för rekombinant protein A

• Källa: E. coli
• Molekylvikt:∼ 44 600 (Senbar MW av SDS-PAGE: 45 000)
• Form: saltfritt pulver
• A280 av 0,1% lösning:∼ 0,165
• Isoelektrisk punkt (pI): 4,7 4,–8

Interaktionen mellan protein A och IgG är inte likvärdig för alla arter. Även inom en art interagerar Protein A med vissa underklasser av IgG och inte andra. Till exempel binder humant IgG1, IgG2 och IgG4 starkt, medan IgG3 inte binder. Det finns också många fall där monoklonala antikroppar inte binder till protein A, särskilt majoriteten av råttimmunoglobuliner och mus IgG1.