Thermo Scientific™ Pierce™ Kvantitativa peptidanalyser& Standarder

•Känsliga —upptäcker exakt så lite som 5μ g/ml (fluorometrisk) eller 25μ g/ml (kolorimetrisk) peptidblandning
•Reproducerbar —analysprestanda noggrant testad med peptidsmältningsblandningar
•Robust peptidsmältningsstandardkit innehåller en —validerad peptidsmältningsstandard för förbättrad reproducerbarhet av kvantifiering
•Kompatibel fungerar med många —reagenser, inklusive MS-provberedningsreagenser och TMT-märkta peptider (fluorometrisk analys)
•Bekvämt enkelt, blanda-—och-läs-format med stabil signal som kan läsas på så lite som 5 minuter (fluorometrisk) eller 15 minuter (kolorimetrisk)

Pierce kvantitativ kolorimetrisk peptidanalys ger modifierad BCA reagenser för reduktion av Cu+2 till Cu+1, en patenterad kelator optimerad för kvantifiering av peptidblandningar, och referensstandard för peptidnedbrytning för användning vid generering av linjära standardkurvor för kontroll. Denna kolorimetriska peptidanalys kräver en liten mängd prov (20μ L) och har ett arbetspeptidkoncentrationsområde på 25 1000–μ g/ml. I reaktionen reduceras kopparn först av amidryggraden av peptider under alkaliska förhållanden (Biuret-reaktion), följt av kelatorn kopplas till den reducerade kopparn för att bilda ett ljusrött komplex (absorberas vid 480 nm) som kan avläsas på så lite som 15 minuter. Signalen som produceras från denna reaktion –är 3 4 gånger känsligare än Micro-BCA Protein Assay för peptidanalys. Kolorimetrisk peptidanalys är kompatibel med TMT-märkta peptider men rekommenderas inte för syntetiska peptider eftersom analysen påverkas av innehållet av peptidaminosyra.

Pierce kvantitativa fluorescerande peptidanalysreagenser inkluderar peptidanalysbuffert, fluorescerande peptidmärkningsreagens och en peptidsmältningsanalysstandard för kvantitativ mätning av peptidkoncentrationer. Denna känsliga analys kräver endast 10μ L av provet, ger ett linjärt svar med ökande peptidkoncentrationer (5 –1000μ g/ml), och resulterar i en stabil slutlig fluorescens som kan detekteras på så lite som 5 minuter. I denna analys är peptider specifikt märkta vid aminoterminalen med användning av ett aminreaktivt fluorescerande reagens som är icke-fluorescerande tills det reagerar med tryptiska peptider. De fluorescensmärkta peptiderna detekteras på en mikroplattläsare (ex390/em475). Denna analys är lämplig för kvantitativ mätning av peptidnedbrytningsblandningar och syntetiska peptider med en oblockerad aminoterminal. Fluorescerande analyser är inte kompatibla med TMT-märkta peptider.

Thermo Scientific Peptide Digest Assay Standard utformades som en referensstandard för användning med Pierce kvantitativa fluorometriska och kolorimetriska peptidanalyser för att förbättra reproducerbarheten och noggrannheten i peptidkvantifieringen. Peptide Digest Assay Standard tillhandahålls i vätskeformat färdigt att använda med 1 mg/ml. Referensproteinet har digererats med MS-grade trypsin för att minimera missade klyvningar. För att säkerställa konsekvent prestanda övervakas proteinets matsmältningseffektivitet för att säkerställa konsistens från lot till lot, och kvaliteten bedöms genom jämförelse med en referensstandard.

Ansökningar
• Normalisering av provkoncentrationer för kvantitativa nedströmsapplikationer
• Normalisering av provladdningsvolymer för LC-, MS- och LC/MS-applikationer
• Mätning av återhämtning efter peptidsaneringsprocedurer