Thermo Scientific™ Pierce™ S-Nitrosylation Western Blot Kit och HENS Buffer

S-nitrosylering är en post-translationell modifiering som reglerar många processer, inklusive cellulär proliferation, apoptos, avslappning av glatt muskulatur, frisättning av neurotransmittorer och differentiering. Under S-nitrosylering reagerar kväveoxidradikaler med cysteintioler för att producera en S-NO-addukt som ändrar proteinaktivitet.

Pierce S-Nitrosylation Western Blot Kit
Pierce S-Nitrosylation Western Blot Kit tillhandahåller de nödvändiga reagensen för att utföra en modifierad version av den traditionella S-nitrosyleringsväxlingsanalysen, inklusive ett cysteinblockerande reagens, reduktionsmedel, reaktionsbuffert, iodoTMT märkningsreagens och anti-TMT-antikropp. Märkning åstadkoms med hjälp av icke-biologiska iodoTMT reagens istället för HPDP-biotin, vilket minskar bakgrundssignalen under western blot-detektion. Förutom detektion av S-nitrosylerade proteiner genom western blöt, kan ett immobiliserat anti-TMT-harts användas för att selektivt berika S-nitrosylerade proteiner/peptider märkta med iodoTMT reagenser. Detta arbetsflöde möjliggör kartläggning av S-nitrosyleringsställen och multiplexerad kvantifiering med hjälp av masspektrometri.

Funktioner hos Pierce S-Nitrosylation Western Blot Kit inkluderar:
•Specifika —optimerade märkningsreaktioner byter S-nitrosocystein efter translationella modifieringar med iodoTMT reagens för enkel detektering med western blot med anti-TMT-antikropp
•Bättre signal-till-brus —använder en icke-biologisk iodoTMT reagens för märkning istället för HPDP-biotin, vilket resulterar i mindre bakgrund under western blot-detektion
•Arbetsflödeskompatibel —märkningsmetod är kompatibel med alternativa analysmetoder, inklusive anrikning via anti-TMT-harts och multiplexkvantifiering med masspektrometri
•Bekväm alla nödvändiga —reagenser inkluderade ett kit

HENS Buffert
HENS Buffer består av 100 mM HEPES (pH 7,8), 1 mM EDTA, 0,1 mM Neocuproine och 1 % SDS. Det är en cellysbuffert avsedd för användning med Pierce S-Nitrosylation Western Blot Kit, som möjliggör känslig detektering av protein S-nitrosocystein post-translationella modifieringar i ett komplett, lättanvänt kit.