Invitrogen™ PrestoBlue™ och PrestoBlue™ HS-cellviabilitetsreagenser

Att mäta förändringar i cellviabilitet är en grundläggande metod för att bedöma cellhälsa, bestämma genotoxicitet och utvärdera läkemedel mot cancer. Cellhälsa kan övervakas genom att detektera förändringar i flera nyckelindikatorer, inklusive förändringar i plasmamembranintegritet, DNA-syntes, DNA-innehåll, enzymaktivitet, närvaro av ATP och cellulär reducerande miljö.

Funktioner av PrestoBlue och PrestoBlue HS-cellviabilitetsreagenser inkluderar:

• Optimerad för tillförlitlig detektering av däggdjurscellers livsduglighet på bara 10 minuter
• Mät cellviabilitet och proliferation i olika celltyper, inklusive däggdjur (2D och 3D), bakterier och jästceller
• Ett bekvämt format för att lägga —till och läsa, ingen blandning, tvättning eller cellys krävs
• Kompatibel med antingen fluorescens- eller absorbansbaserade mikroplattläsare
• Få högkvalitativa cellproliferationsresultat med ett stort dynamiskt omfång
• Övervaka levande celler med hjälp av realtidskinetik och fortsätt att odla dem för multiplexerade funktionella analyser nedströms

Snabba 10 minuters inkubationer

Upptäck livsduglighet hos däggdjursceller efter bara 10 minuters inkubation med PrestoBlue och PrestoBlue HS-cellviabilitetsreagenser. Dessa är de enda levande cellers viabilitetsreagenser på marknaden som ger robusta data inom 10 minuter efter tillsats av reagens. Alla andra resazurinbaserade cellviabilitetsreagenser kräver 1 4 –timmars inkubation med reagenset innan data erhålls. För bästa resultat med 3D-prover, rekommenderas att inkubera proverna i 18 –24 timmar före mätningarna.

Exceptionell känslighet och noggrannhet

PrestoBlue och PrestoBlue HS-cellviabilitetsreagenser kan detektera så få som 12 celler per brunn i en platta med 384 brunnar, beroende på celltyp och inkubationstid. Efter 10 minuters inkubation, PrestoBlue reagens kan linjärt detektera celler ner till 98 celler/brunn med ett Z'-värde större än 0,5.

Förenklat analysformat

PrestoBlue och PrestoBlue HS-cellviabilitetsreagenser är reagenser som endast kan användas som tillsats, vilket eliminerar behovet av cellys eller solubiliseringssteg som krävs av andra analyser. Detta minimerar praktisk tid och förenklar processen.

Otoxiska analyser av levande celler

PrestoBlue och PrestoBlue HS-cellviabilitetsreagenser är icke-toxiska och kräver inte cellys, vilket gör att cellerna kan inkuberas i upp till 24 timmar. Eftersom ingen lysering krävs, späds den ut PrestoBlue eller PrestoBlue HS-lösning kan avlägsnas från cellerna och ersättas med komplett tillväxtmedium för vidare odling och användning i nedströmsanalyser.

PrestoBlue HS-—reagens en högrenad version av PrestoBlue reagens med förbättrad prestanda

Alla resazurinbaserade reagenser innehåller en detekterbar mängd resorufinkontamination på grund av syntesen och tillverkningsprocessen, vilket bidrar till hög bakgrundsfluorescens och minskar prestandan i cellviabilitetsanalyser. För att minska bakgrunden och förbättra prestandan utvecklades en innovativ reningsprocess för att avlägsna det förorenande resorufinet, vilket resulterade i det mycket rena resazurinet som används i PrestoBlue HS-cellviabilitetsreagens. Detta mycket renade, ogiftiga resazurin minskar bakgrundsfluorescens med> 50 % och ökar signal-till-bakgrund med> 100 % i cellviabilitetsmikroplattanalyser.

Funktioner av PrestoBlue HS Cell Viability Reagent inkluderar:

• Avlägsnande av föroreningar från resazurin, vilket resulterar i> 50 % minskning av bakgrundsfluorescens
• Ökat signal-till-bakgrundsförhållande med> 100 %, vilket ger ett stort analyssignalfönster
• Erbjuder hög känslighet med ett linjärt svar, detekterar så få som 10 celler per brunn

Mekanism av PrestoBlue och PrestoBlue HS-reagens

Att använda resazurinbaserade reagens för att övervaka förändringar i cellulär reducerande miljö eller metabolisk aktivitet är en väletablerad och pålitlig metod för att indikera cellviabilitet eller död. PrestoBlue och PrestoBlue HS-reagenser innehåller resazurin, som är en ogiftig, cellgenomsläpplig förening som är blå till färgen och praktiskt taget icke-fluorescerande. När den läggs till celler, den resazurin-baserade PrestoBlue och PrestoBlue HS-reagenser går in i cellerna och modifieras av den reducerande miljön av livskraftiga celler. I levande celler reduceras resazurin till resorufin, en förening som är röd till färgen och mycket fluorescerande. Livskraftiga celler omvandlar kontinuerligt resazurin till resorufin, vilket ökar den totala fluorescensen av mediet som omger cellerna. Omvandlingen av resazurin till resorufin resulterar också i en uttalad färgförändring, vilket gör att cellviabilitet kan detekteras med antingen absorbans- eller fluorescensbaserade plattläsare.