Thermo Scientific™ SILAC Proteinkvantifieringskit (Trypsin), RPMI 1640

Funktioner av SILAC Proteinkvantifieringskit, RPMI 1640, inkluderar:
• Effektiv —upp till 100 % märkningsintegrering i proteiner från levande celler
• —Reproducerbar minimerar intra-experimentell variabilitet orsakad av differentiell provberedning
• —Flexibla medier som saknar både L-lysin och L-arginin, vilket möjliggör mer fullständig proteomtäckning genom dubbel aminosyraisotopmärkning
• —Kompatibla märkningsproteiner uttryckta i en mängd olika däggdjurscellinjer anpassade att växa i RPMI 1640-medium, inklusive HeLa, 293T, COS7, U2OS, A549, A431, HepG2, NIH 3T3, Jurkat och andra
• —Högkvalitativa kompletterar tunga aminosyror med> 99 % isotoprenhet; dialyserad FBS testad för att säkerställa att den är steril,

endotoxinfri och cellkulturkompatibel. SILAC Proteinkvantifieringssats:
• Kvantitativ analys av relativa förändringar i proteinmängd från olika cellbehandlingar
• Kvantitativ analys av proteiner för vilka det inte finns några tillgängliga antikroppar
• Proteinuttrycksprofilering för att studera normala vs sjukdomsceller
• Identifiering och kvantifiering av hundratals till tusentals proteiner i ett enda experiment

SILAC är en kraftfull metod för att identifiera och kvantifiera relativa differentiella förändringar i komplexa proteinprover. Detta tillvägagångssätt innebär in vivo metabolisk inkorporering av ''tunga'' ¹³ C- eller ¹⁵ N-märkta aminosyror i proteiner följt av masspektrometri (MS) för accelererad och omfattande identifiering, karakterisering och kvantifiering av proteiner.

Eftersom peptider märkta med tunga och lätta aminosyror är kemiskt identiska, samelueras de under omvänd fas kolonnförfraktionering och detekteras därför samtidigt under MS-analys. De relativa toppintensiteterna för flera isotopiskt distinkta peptider från varje protein används sedan för att bestämma den genomsnittliga förändringen i proteinmängd i det behandlade provet.

Trypsin SILAC kit levereras med ¹³ C ₆¹⁵ N 13 C ₆¹⁵ N ₄ L-arginin-HCl för att märka och kvantifiera lysin-innehållande och arginin-innehållande peptider från trypsinproteinspjälkning. Varje kit innehåller också 2 x 500 ml medium och dialyserat serum. I kombination med Thermo Scientific anrikningsprodukter för protein/peptidprov, SILAC Proteinkvantifieringskit möjliggör även MS-analys av proteiner med låg förekomst som cellyteproteiner, organellspecifika proteiner och posttranslationella proteinmodifieringar som fosforylering eller glykosylering.