Läs mer
Invitrogen™ SuperScript™ IV Syntessystem för första strängen
Beskrivning
SuperScript IV First-Strand Synthesis-system för RT-PCR, tillgängligt med eller utan ezDNas, är optimerat för syntes av första-strängs-cDNA från renat poly(A)+ eller totalt RNA. Systemet inkluderar SuperScript IV omvänt transkriptas (RT), en patenterad MMLV-mutant som producerar robust och pålitlig cDNA-syntes i RT-reaktioner. SuperScript IV First-Strand Synthesis-system med ezDNase har en ytterligare förmåga att ta bort potentiell genomisk DNA-kontamination.
SuperScript IV-syntessystemet är avsevärt förbättrat jämfört med det SuperScript III-baserade systemet vad gäller inhibitorresistens, processivitet och reaktionshastighet, samtidigt som alla fördelar med det tidigare systemet bibehålls, inklusive ökad termostabilitet, mycket effektiv full längds cDNA-syntes och minskat RNas aktivitet. SuperScript IV-system är designat för att ge tillförlitlig, konsekvent och snabb cDNA-syntes i närvaro av inhibitorer som finns i en mängd olika prover och som gör att andra tillgängliga RT:er fungerar ineffektivt.
Det extremt förenklade genomiska DNA- borttagningssteget i SuperScript IV First-Strand Synthesis-system med ezDNase minskar dramatiskt tiden för hela omvänd transkriptionsprotokollet och minskar möjlig variation i genuttryck på grund av RNA-förlust eller skada under konventionell DNas-behandling. SuperScript IV-syntes-system med ezDNase är det bästa valet för prestanda och flexibilitet för RT-PCR-tillämpningar. Vi rekommenderar det för alla RT-PCR-tillämpningar, särskilt när reproducerbarhet och tillförlitlighet är det primära problemet och när hämmare i RNA-provet kan störa cDNA-syntesen, vilket leder till bias i genuttrycksstudier.
Båda SuperScript IV First-Strand Synthesis-systemen innehåller alla komponenter som behövs för RT-reaktioner, plus en extra kontrollgen och primers, och ger flexibiliteten att anpassa RT-uppsättningen för att passa behoven i din tillämpning.
Funktioner i SuperScript IV First-Strand Synthesis-system inkluderar:
- Betydligt förbättrad resistens mot en mängd olika inhibitorer som kan störa cDNA-syntesen
- Robust och specifik cDNA-syntes i ett brett spektrum av provtyper
- En snabbare omvänd transkriptasreaktion som minskar inkubationstiden från> 50 min till 10 min
- Betydligt bättre processivitet jämfört med SuperScript III RT
- Förenklat steg för borttagning av genomiskt DNA (SuperScript IV-syntessystem med endast ezDNase)
Enzymkälla
Renad från E. coli som uttrycker M-MLV:s pol-gen, modifierad för att öka termostabilitet, halveringstid, processivitet och inhibitorresistens och för att minska RNas H-aktivitet.
Prestanda- och kvalitetstestning
Endodeoxiribonukleas-, exodeoxiribonukleas- och ribonukleasanalyser; och utbyte och längd av cDNA-produkt
Enhetsdefinition
En enhet av SuperScript IV RT är mängden enzym som krävs för att införliva 1 nmol deoxiribonukleotid i syrautfällbart material på 10 minuter vid 37°C med användning av poly(A) oligo(dT) 12–18 som mall/primer.
Enhetsreaktionsbetingelser
50 mM Tris-HCl (pH 8,3), 4 mM MgCl2 , 10 mM DTT, 50 mM KCl, 0,5 mM dTTP, 0,4 MBq/ml [ 3H ]-dTTP, 0,4 mM poly(A) oligo (dT) ) 12-18 och enzym i 20μ L i 10 min vid 37°C
Specifikationer
Specifikationer
| Innehåll och lagring | • Oligo(dT)20 , 50 μL (50 μM) • Random hexamers, 250 μL (50 ng/μL) • 5X RT buffer, 1 mL • DTT, 250 μL (0.1 M) • dNTP mix, 250 μL (10 mM) • SuperScript IV RT, 50 μL (200 U/μL) • Ribonuclease Inhibitor, 100 μL (40 U/μL) • E. coli RNase H, 50 μL (2 U/μL) • DEPC-treated water, 1.2 mL • Total HeLa RNA, 20 μL (10 ng/μL) • Sense Control Primer, 25 μL (10 μM) • Antisense Control Primer, 25 μL (10 μM) Store at -15°C to -25°C. |
| Formatera | Sats |
| GC-rik PCR-prestanda | Hög |
| Reaktionshastighet | 10 min. |
| Teknik | Omvänd transkription |
| Optimal reaktionstemperatur | 50 °C |
| Kvantitet | Varje |
| Omvänt transkriptas | SuperScript IV |
| Frakt skick | Torr is |
| För användning med (applikation) | RT-PCR, Realtids-PCR (qPCR) |
| Visa mer |
Säkerhet och hantering
- SuperScript IV First-Strand Synthesis System
- Varning
- Allvarlig ögonskada/ögonirritation Kategorija 2
- H319-Orsakar allvarlig ögonirritation.
- P264-Tvätta grundligt efter användning.
- P280-Använd skyddshandskar/skyddskläder/ögonskydd/ansiktsskydd.
- P305+P351+P338-VID KONTAKT MED ÖGONEN: Skölj försiktigt med vatten i flera minuter. Ta ur eventuella kontaktlinser om det går lätt. Fortsätt att skölja.
- P337+P313-Vid bestående ögonirritation: Sök läkarhjälp.
- MIXTURE LIST-Innehåller: (R*,R*)-1,4-Dimercapto-2,3-butanediol
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Din input är viktig för oss. Fyll i det här formuläret för att ge feedback relaterad till innehållet på denna produkt.