Läs mer
Invitrogen™ SuperScript™ IV Syntessystem för första strängen
Beskrivning
SuperScript IV First-Strand Synthesis-system för RT-PCR, tillgängligt med eller utan ezDNas, är optimerat för syntes av första-strängs-cDNA från renat poly(A)+ eller totalt RNA. Systemet inkluderar SuperScript IV omvänt transkriptas (RT), en patenterad MMLV-mutant som producerar robust och pålitlig cDNA-syntes i RT-reaktioner. SuperScript IV First-Strand Synthesis-system med ezDNase har en ytterligare förmåga att ta bort potentiell genomisk DNA-kontamination.
SuperScript IV-syntessystemet är avsevärt förbättrat jämfört med det SuperScript III-baserade systemet vad gäller inhibitorresistens, processivitet och reaktionshastighet, samtidigt som alla fördelar med det tidigare systemet bibehålls, inklusive ökad termostabilitet, mycket effektiv full längds cDNA-syntes och minskat RNas aktivitet. SuperScript IV-system är designat för att ge tillförlitlig, konsekvent och snabb cDNA-syntes i närvaro av inhibitorer som finns i en mängd olika prover och som gör att andra tillgängliga RT:er fungerar ineffektivt.
Det extremt förenklade genomiska DNA- borttagningssteget i SuperScript IV First-Strand Synthesis-system med ezDNase minskar dramatiskt tiden för hela omvänd transkriptionsprotokollet och minskar möjlig variation i genuttryck på grund av RNA-förlust eller skada under konventionell DNas-behandling. SuperScript IV-syntes-system med ezDNase är det bästa valet för prestanda och flexibilitet för RT-PCR-tillämpningar. Vi rekommenderar det för alla RT-PCR-tillämpningar, särskilt när reproducerbarhet och tillförlitlighet är det primära problemet och när hämmare i RNA-provet kan störa cDNA-syntesen, vilket leder till bias i genuttrycksstudier.
Båda SuperScript IV First-Strand Synthesis-systemen innehåller alla komponenter som behövs för RT-reaktioner, plus en extra kontrollgen och primers, och ger flexibiliteten att anpassa RT-uppsättningen för att passa behoven i din tillämpning.
Funktioner i SuperScript IV First-Strand Synthesis-system inkluderar:
- Betydligt förbättrad resistens mot en mängd olika inhibitorer som kan störa cDNA-syntesen
- Robust och specifik cDNA-syntes i ett brett spektrum av provtyper
- En snabbare omvänd transkriptasreaktion som minskar inkubationstiden från> 50 min till 10 min
- Betydligt bättre processivitet jämfört med SuperScript III RT
- Förenklat steg för borttagning av genomiskt DNA (SuperScript IV-syntessystem med endast ezDNase)
Enzymkälla
Renad från E. coli som uttrycker M-MLV:s pol-gen, modifierad för att öka termostabilitet, halveringstid, processivitet och inhibitorresistens och för att minska RNas H-aktivitet.
Prestanda- och kvalitetstestning
Endodeoxiribonukleas-, exodeoxiribonukleas- och ribonukleasanalyser; och utbyte och längd av cDNA-produkt
Enhetsdefinition
En enhet av SuperScript IV RT är mängden enzym som krävs för att införliva 1 nmol deoxiribonukleotid i syrautfällbart material på 10 minuter vid 37°C med användning av poly(A) oligo(dT) 12–18 som mall/primer.
Enhetsreaktionsbetingelser
50 mM Tris-HCl (pH 8,3), 4 mM MgCl2 , 10 mM DTT, 50 mM KCl, 0,5 mM dTTP, 0,4 MBq/ml [ 3H ]-dTTP, 0,4 mM poly(A) oligo (dT) ) 12-18 och enzym i 20μ L i 10 min vid 37°C
Specifikationer
Specifikationer
| Innehåll och lagring | • Oligo(dT)20 , 50 μL (50 μM) • Random hexamers, 250 μL (50 ng/μL) • 5X RT buffer, 1 mL • DTT, 250 μL (0.1 M) • dNTP mix, 250 μL (10 mM) • SuperScript IV RT, 50 μL (200 U/μL) • Ribonuclease Inhibitor, 100 μL (40 U/μL) • E. coli RNase H, 50 μL (2 U/μL) • DEPC-treated water, 1.2 mL • Total HeLa RNA, 20 μL (10 ng/μL) • Sense Control Primer, 25 μL (10 μM) • Antisense Control Primer, 25 μL (10 μM) Store at -15°C to -25°C. |
| Formatera | Sats |
| GC-rik PCR-prestanda | Hög |
| Reaktionshastighet | 10 min. |
| Teknik | Omvänd transkription |
| Optimal reaktionstemperatur | 50 °C |
| Kvantitet | Varje |
| Omvänt transkriptas | SuperScript IV |
| Frakt skick | Torr is |
| För användning med (applikation) | RT-PCR, Realtids-PCR (qPCR) |
| Visa mer |
Säkerhet och hantering
- SuperScript IV First-Strand Synthesis System
- Varning
- Allvarlig ögonskada/ögonirritation Kategorija 2
- H319-Orsakar allvarlig ögonirritation.
- P264-Tvätta grundligt efter användning.
- P280-Använd skyddshandskar/skyddskläder/ögonskydd/ansiktsskydd.
- P305+P351+P338-VID KONTAKT MED ÖGONEN: Skölj försiktigt med vatten i flera minuter. Ta ur eventuella kontaktlinser om det går lätt. Fortsätt att skölja.
- P337+P313-Vid bestående ögonirritation: Sök läkarhjälp.
- MIXTURE LIST-Contain: (R*,R*)-1,4-Dimercapto-2,3-butanediol
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
En cliquant sur Soumettre, vous reconnaissez que vous pouvez être contacté par Fisher Scientific au sujet des informations que vous avez fournies dans ce formulaire. Nous ne partagerons pas vos informations à d'autres fins. Toutes les informations de contact fournies seront également conservées conformément à notre politique de confidentialité. Politique de confidentialité.