Invitrogen™ SuperScript™ IV omvänd Transcriptase

SuperScript IV omvänt transkriptas (RT) är en patenterad MMLV-mutant med överlägsen robusthet och tillförlitlighet i RT-reaktioner. Det är avsevärt förbättrat jämfört med SuperScript III RT när det gäller hämmarresistens, processivitet och reaktionshastighet, samtidigt som det behåller alla fördelarna med det enzymet, inklusive ökad termostabilitet, högeffektiv fullängds cDNA-syntes och minskad RNas-aktivitet. SuperScript IV RT är designat för att ge tillförlitlig, konsekvent och snabb cDNA-syntes i närvaro av hämmare som finns i en mängd olika prover som gör att andra för närvarande tillgängliga RT:er fungerar ineffektivt.

SuperScript IV RT erbjuder fördelar vid standard såväl som förhöjda temperaturer jämfört med klonad AMV och ThermoScript RT, inklusive högre känslighet, hämmartolerans och förmåga att arbeta med nedbrutet RNA.

Funktioner i SuperScript IV omvänt transkriptas inkluderar:

• Betydligt förbättrad resistens mot hämmare som kan störa cDNA-syntesen
• Robust och specifik cDNA-syntes i ett brett spektrum av provtyper
• Snabbare omvänd transkriptasreaktion minskar inkubationstiden från> 50 minuter till 10 minuter
• Bättre processivitet jämfört med SuperScript III RT

SuperScript IV RT är det bästa valet för alla RT-PCR- och qRT-PCR-tillämpningar i SuperScript-produktfamiljen när reproducerbarhet och tillförlitlighet är det primära problemet. Det är också vår bästa RT när hämmare i RNA-provet kan störa cDNA-syntesen, vilket leder till fördomar i genuttrycksstudier.

Källa
Renad från E. coli som uttrycker pol-genen av M-MLV, modifierad för att öka termostabilitet och halveringstid, processivitet, inhibitorresistens och för att minska RNas H-aktivitet

Enhetsdefinition
En enhet av SuperScript IV RT är mängden enzym som krävs för att inkorporera 1 nmol deoxiribonukleotid till syrautfällbart material på 10 minuter vid 37°C med användning av poly(A) oligo(dT) _12–18 som mall/primer.

Enhetens reaktionsförhållanden
50 mM Tris-HCl (pH 8,3), 4 mM _MgCl2 , 10 mM DTT, 50 mM KCl, 0,5 mM dTTP, 0,4 MBq/ml [ ³H ]-dTTP, 0,4 mM poly(A) oligo (dT) ) _12–18 och enzym i 20 μl i 10 min vid 37°C.