Invitrogen™ SuperScript™ IV encellig/låg ingång cDNA PreAmp Kit

De Invitrogen SuperScript IV Single Cell/Low Input cDNA PreAmp Kit är designat för effektiv cDNA-syntes och amplifiering direkt från intakta enstaka celler (1 –1 000) eller låga mängder totalt RNA (2 pg –10 ng). Den innehåller alla komponenter som krävs för att utföra cellys, omvänd transkription (RT) och PCR-amplifiering i ett bekvämt förblandat format. En kombination av överlägsna enzymer (SuperScript IV Reverse Transcriptase och platina SuperFi U DNA Polymerase) möjliggör hög avkastning, känslighet och noggrannhet. På grund av de korta reaktionstiderna och minimala hands-on-tiden kan detta enkla en-rörs förförstärkningsprotokoll slutföras på drygt två timmar. Det globala cDNA av hög kvalitet som erhålls kan användas för nästa generations sekvensering (NGS ) applikationer eller för genuttrycksanalys genom realtids-PCR.

Funktioner i SuperScript IV Single Cell/Low Input cDNA PreAmp Kit inkluderar:
•Överlägsen känslighet för enkel detektering av låga mängder av mål (så låg som en cell eller 2 pg totalt RNA)
• Högkvalitativt cDNA för transkriptionsinformation i full längd med enhetlig täckning
• Strömlinjeformat arbetsflöde med enkelt enrörsprotokoll
• Korta lyserings- och omvänd transkriptionstider för tidsbesparingar
• Global förförstärkning kompatibel med nedströmsanalys av NGS eller realtids-PCR

SuperScript IV Single Cell/Low Input cDNA PreAmp Kit utnyttjar det terminala deoxinukleotidyltransferaset (TdT ) aktivitet för SuperScript IV Reverse Transcriptase . Infångande oligonukleotid innehållande oligo(dT) och adaptersekvenser används som primer för selektiv första sträng cDNA-syntes från poly(A)-innehållande RNA. När det omvända transkriptaset når 5‘ slutet av RNA-mallen, TdT aktivitet lägger till –1 3 extra nukleotider till cDNA-änden, vilket möjliggör mallbyte och ligeringsfri inkorporering av adaptersekvensen i 3‘ slutet av det resulterande cDNA:t. Den höga känsligheten och mallväxlingseffektiviteten hos SuperScript IV Reverse Transcriptase tillåta fångst av mål med låg förekomst.

Adaptersekvenser inkorporerade i båda ändarna av cDNA:t tjänar som primerbindningsställen i det efterföljande PCR-amplifieringssteget, vilket möjliggör global föramplifiering av mallarna i full längd. Den medföljande platina SuperFi U Preamplification Master Mix innehåller ett överlägset högtroget DNA-polymeras som säkerställer effektiv amplifiering av långa mallar (upp till 10 kb) utan PCR-inducerad bias eller fel.