Invitrogen™ SYBR™ Green Fast Advanced Cells-to-CT™ Utrustning

SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct-sats är ett komplett cellysatsystem designat för genuttrycksanalys direkt från odlade celler utan RNA-rening. SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct-cellyseringsreagenser levereras med Cells-to-Ct Fast Advanced-omvänd transkriptionsenzymmix med högsta känslighet, 2X RT-buffert och den bästa PowerUp SYBR Green mastermix. SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct-sats ger dig den känslighet du behöver i det snabbaste arbetsflödet som finns: få genuttrycksanalysresultat från en hel platta med celler på cirka 1,5 timme.

• Komplett —optimerat arbetsflöde inkluderar cellysreagenser med gDNA-borttagning, ny Fast Advanced RT-enzymmix, buffert och ny PowerUp SYBR Green Fast Advanced mastermix
• Snabb —7-minuters provförberedelse, inklusive DNas-behandling, vid rumstemperatur
• Lätt —lysera prover i ett rör eller direkt i odlingsplattor
• Robust —utföra genuttrycksanalys på 10 100 000 –celler per prov; resultat ekvivalenta med de från renat RNA
• Effektiv —innehåller tillräckligt med reagens för att generera 1000 realtids-PCR-resultat från 100 startprover

Unik metod eliminerar behovet av att isolera RNA från odlade celler
Cells-to-Ct-metoden har ett unikt lyseringreagens som lyserar celler och skyddar RNA. DNA-borttagning sker samtidigt i 5-minuters lyseringssteget för att spara tid och förbättra användarvänligheten. Lysering stoppas sedan genom tillsats av en Stopplösning som irreversibelt binder till lyseringsreagenserna.

SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT-sats innehåller Cells-to-Ct Fast Advanced omvänt transkriptionsreagens (RT) för cDNA-syntes och PowerUp SYBR Green mastermix för realtids-PCR-analys. Primersets tillhandahålls av användaren.

Enkel 7-minuters provberedning
SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT-sats är designat för 10 100 000 –odlade celler/prov. Celler tvättas i PBS och lyseras i lyseringslösning under fem minuter vid rumstemperatur; DNas-behandling kan utföras samtidigt. Lyseringen avslutas vid rumstemperatur genom en 2-minuters inkubation med stopplösning. Lysaten är nu redo för omvänd transkription eller lagring kl–°20 C på kort sikt eller -80 C på lång sikt.

Maximera känsligheten för detektion
Till skillnad från vissa konkurrerande satser som begränsar mängden lysat i RT-reaktionen till 10 %, kan SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT-satsen rymma 45 % av den totala RT-reaktionsvolymen som cellysat. Dessutom kan cDNA utgöra upp till 30 % av realtids-PCR-reaktionsvolymen. Den stora lysatvolymen i den optimerade RT-reaktionen, tillsammans med den stora cDNA-volymen i den efterföljande realtids-PCR med PowerUP SYBR Green mastermix, leder till maximal känslighet. Mastermixen amplifierar målet exakt och exakt, vilket möjliggör detektering av små kvantiteter av mål, såsom transkript som uttrycks vid låga nivåer.

Minskad provförlust och överföringsfel
Eftersom prover kan bearbetas direkt i odlingsbrunnar (96 eller 384 brunnar) minimeras provhanteringen och risken för provförlust eller överföringsfel, vilket underlättar snabb bearbetning med hög genomströmning. Till skillnad från gammaldags RNA-isoleringsprotokoll i flera steg krävs inga steg för uppvärmning, tvättning eller centrifugering. Satsen förenklar avsevärt en krävande 30–60 minuters process och minskar den till 7 minuter.

Beprövad prestation, bevisad tillsammans
Alla komponenter i SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT-sats har optimerats för konsekvent och pålitlig prestanda. Det innebär att du slipper gissa dig till vad som krävs för att sätta ihop separata satser för provberedning, RT och realtids-PCR, vilket ger dig den känslighet du behöver i det snabbaste arbetsflödet från prov till svar som finns.