Invitrogen™ SYBR™ Green Fast Advanced Cells-to-CT™ Utrustning

Unik metod eliminerar behovet av att isolera RNA från odlade celler
Metoden Cells-to-Ct har ett unikt lysreagens som lyserar celler och skyddar RNA. DNA-borttagning sker samtidigt under 5-minuterslyssteget för att spara tid och förbättra användarvänligheten. Lysen stoppas sedan genom att tillsätta en 'Stop Solution' som irreversibelt binder till lysreagensen.

SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT Kit innehåller Cells-to-Ct Fast Advanced reverse transcription (RT)-reagenser för cDNA-syntes och PowerUp SYBR Green Master Mix för realtidsanalys av PCR. Primer-set tillhandahålls av användaren.

Enkel 7-minuters provberedning
Green SYBR Fast Advanced Cells-to-CT Kit är utformat för 10 –stycken 100 000 odlade celler/prov. Cellerna tvättas i PBS och lyseras i lyslösning i fem minuter vid rumstemperatur; DNasebehandling kan utföras samtidigt. Lysen avslutas vid rumstemperatur med en 2-minuters inkubation med Stop Solution. Lysaterna är nu redo för omvänd transkription eller lagring vid –20 °C under en kort period eller -80 °C under lång tid.

Maximera känsligheten för detektion
Till skillnad från vissa konkurrentkit som begränsar mängden lysat i RT-reaktionen till 10 %, SYBR kan Green Fast Advanced Cells-to-CT Kit rymma 45 % av den totala RT-reaktionsvolymen som celllysat. Dessutom kan cDNA utgöra upp till 30 % av realtidsvolymen av PCR-reaktionen. Den stora lysatvolymen i den optimerade RT-reaktionen, tillsammans med den stora cDNA-volymen i den efterföljande realtids-PCR med Green PowerUP SYBR Master Mix, leder till maximal känslighet. Mastermixen förstärker målet exakt och noggrant, vilket möjliggör detektion av små mängder mål, såsom transkript uttryckta vid låga nivåer.

Minskad provförlust och överföringsfel
Eftersom prover kan bearbetas direkt i odlingsbrunnar (96 eller 384 brunnar) minimeras provhantering och risken för provförlust eller överföringsfel, vilket underlättar snabb högkapacitetsbearbetning. Till skillnad från gammaldags, flerstegs RNA-isoleringsprotokoll krävs inga uppvärmnings-, tvätt- eller centrifugeringssteg. Kitet förenklar kraftigt en arbetsamisk process på 30 –till 60 minuter och reducerar den till 7 minuter.

Beprövad prestation, bevisad tillsammans
Alla komponenter i SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT Kit har optimerats för konsekvent och pålitlig prestanda. Detta tar bort gissningsarbetet med att sätta ihop separata provförberedelse-, RT- och realtids-PCR-kit, vilket ger dig den känslighet du behöver i det snabbaste arbetsflödet från prov till svar.