Läs mer
Descripción
Katalysera bildandet av en fosfodiesterbindning mellan intill varandra liggande 5'-fosfat- och 3'-hydroxylterminaler i duplex-DNA eller RNA med Thermo Scientific™ T4 DNA-ligas. Enzymet reparerar enkelsträngade hack i duplex-DNA, RNA eller DNA/RNA-hybrider. Den förenar också DNA-fragment med antingen kohesiva eller trubbiga ändar, men har ingen aktivitet på enkelsträngade nukleinsyror.
De T4 DNA Ligas kräver ATP som en kofaktor.
Höjdpunkter
- Aktiv i Themo Scientific restriktionsenzym, PCR och RT-buffertar (när de kompletteras med ATP )
- Snabb– klibbiga ände ligering fullbordas på 10 minuter vid rumstemperatur
- Levereras med PEG-lösning för effektiv ligering med trubbiga ändar
Användningsområden
- Kloning av restriktionsenzymgenererade DNA-fragment
- Kloning av PCR-produkter
- Sammanfogning av dubbelsträngade oligonukleotidlinkrar eller adaptrar till DNA
- Platsstyrd mutagenes
- Amplifierad fragmentlängd polymorfism (AFLP )
- Ligasmedierad RNA-detektion ( se referens 3)
- Nick-reparation i duplex-DNA, RNA eller DNA/RNA-hybrider
- Självcirkularisering av linjärt DNA.
Anteckningar
- Bindning av T4 DNA-ligas till DNA kan resultera i ett bandskifte i agarosgeler. För att undvika detta, inkubera prover med 6X DNA Loading Dye& SDS- lösning vid °70 C i 5 minuter eller °65 C i 10 minuter och kyl på is före elektrofores.
- Volymen av ligeringsreaktionsblandningen bör inte överstiga 10 % av den kompetenta cellvolymen i transformationsprocessen.
- Före elektrotransformation, ta bort T4 DNA Ligas från ligeringsblandningen genom spinnkolonn eller kloroformextraktion. Det extraherade DNA:t kan fällas ut ytterligare med etanol.
Especificaciones
Especificaciones
| Koncentration | 5 U/μ l |
| Enzym | DNA-ligas |
| Kompatibel buffert | 10X T4 DNA-ligasbuffert |
| Kvantitet | 200 enheter |
| Produkttyp | T4 DNA-ligas |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Al hacer clic en Enviar, acepta que Fisher Scientific se ponga en contacto con usted en relación con los comentarios que ha proporcionado en este formulario. No compartiremos su información para ningún otro fin. Toda la información de contacto proporcionada se mantendrá de acuerdo con nuestra Política de Privacidad. Política de privacidad.