Läs mer
Thermo Scientific™ T4 DNA-ligas (5 U/μ L)
Handla allt Thermo Scientific ProdukterBeskrivning
Katalysera bildandet av en fosfodiesterbindning mellan intill varandra liggande 5'-fosfat- och 3'-hydroxylterminaler i duplex-DNA eller RNA med Thermo Scientific™ T4 DNA-ligas. Enzymet reparerar enkelsträngade hack i duplex-DNA, RNA eller DNA/RNA-hybrider. Den förenar också DNA-fragment med antingen kohesiva eller trubbiga ändar, men har ingen aktivitet på enkelsträngade nukleinsyror.
De T4 DNA Ligas kräver ATP som en kofaktor.
Höjdpunkter
- Aktiv i Themo Scientific restriktionsenzym, PCR och RT-buffertar (när de kompletteras med ATP )
- Snabb– klibbiga ände ligering fullbordas på 10 minuter vid rumstemperatur
- Levereras med PEG-lösning för effektiv ligering med trubbiga ändar
Användningsområden
- Kloning av restriktionsenzymgenererade DNA-fragment
- Kloning av PCR-produkter
- Sammanfogning av dubbelsträngade oligonukleotidlinkrar eller adaptrar till DNA
- Platsstyrd mutagenes
- Amplifierad fragmentlängd polymorfism (AFLP )
- Ligasmedierad RNA-detektion ( se referens 3)
- Nick-reparation i duplex-DNA, RNA eller DNA/RNA-hybrider
- Självcirkularisering av linjärt DNA.
Anteckningar
- Bindning av T4 DNA-ligas till DNA kan resultera i ett bandskifte i agarosgeler. För att undvika detta, inkubera prover med 6X DNA Loading Dye& SDS- lösning vid °70 C i 5 minuter eller °65 C i 10 minuter och kyl på is före elektrofores.
- Volymen av ligeringsreaktionsblandningen bör inte överstiga 10 % av den kompetenta cellvolymen i transformationsprocessen.
- Före elektrotransformation, ta bort T4 DNA Ligas från ligeringsblandningen genom spinnkolonn eller kloroformextraktion. Det extraherade DNA:t kan fällas ut ytterligare med etanol.
Specifikationer
Specifikationer
| Koncentration | 5 U/μ l |
| Enzym | DNA-ligas |
| Kompatibel buffert | 10X T4 DNA-ligasbuffert |
| Kvantitet | 1 000 enheter |
| Produkttyp | T4 DNA-ligas |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Din input är viktig för oss. Fyll i det här formuläret för att ge feedback relaterad till innehållet på denna produkt.