TaqMan™ TaqMan™ Avancerat miRNA cDNA Synthesis Kit

Funktioner av TaqMan Avancerat miRNA-arbetsflöde inkluderar:

•Känslighet: hög känslighet möjliggör kvantifiering av låguttryckande miRNA-mål, särskilt i biologiska vätskor som plasma, serum och vävnad
•Flexibilitet: den universella RT-kemin genererar universella cDNA-mallar för alla miRNA som finns i provet, vilket möjliggör flexibilitet i studiedesign
•Exempel på besparingar: kräver endast 2μ L plasma/serumprovinmatning och genererar tillräckligt med cDNA för 600 qPCR-reaktioner (20μ L) eller 1200 qPCR-reaktioner (10μ L)
•Specificitet: 5’ ligeringssteget möjliggör diskriminering av ett baspar längs hela miRNA-sekvensen, inklusive svårupptäckta felmatchningar på 5’ avsluta
•Guldstandard TaqMan kemi: Detta kit är designat för användning med TaqMan Avancerade miRNA-analyser för qPCR, som bygger på Thermo Fisher Scientifics branschledande bioinformatikanalysdesign pipeline och valideringssystem för att säkerställa hög specificitet och minimal korsreaktivitet, även för närbesläktade miRNA-familjer.

De TaqMan Advanced miRNA cDNA Synthesis Kit använder 3' poly-A svans och 5' ligering av en adaptersekvens för att förlänga de mogna miRNA som finns i provet på varje ände före omvänd transkription. Universella RT-primrar känner igen de universella sekvenserna som finns på både 5' och 3' förlängda ändar av de mogna miRNA:erna. Alla mogna miRNA i provet transkriberas omvänt till cDNA.

För att förbättra detektionen av låguttryckande miRNA-mål amplifieras sedan cDNA:t med hjälp av Universal miR-Amp Primers och miR-Amp Master Mix för att jämnt öka mängden cDNA för varje mål, vilket bibehåller de relativa differentiella uttrycksnivåerna. Till skillnad från traditionell pre-amplifiering känner Universal miR-Amp Primers igen de universella sekvenserna som läggs till alla mogna miRNA på 5'- och 3'-ändarna, vilket säkerställer att det inte finns någon amplifieringsbias.

Obs: den TaqMan Advanced miRNA cDNA Synthesis Kit är inte kompatibelt med första generationen TaqMan MicroRNA-analyser för qPCR. För omvänd transkription av miRNA-mål med hjälp av miRNA-specifika RT-primrar, se TaqMan MicroRNA Reverse Transcription Kit.