Invitrogen™ TaqMan™ Cells-to-CT™ Express Kit

De TaqMan Cells-to-CT Express Kit är ett komplett cellysatsystem designat för genuttrycksanalys direkt från odlade celler utan RNA-rening. Den möjliggör RT-qPCR med högsta känslighet och snabbaste arbetsflöde med bara fem komponenter: Express Lysis Buffer, Express ezDNase , Express RT Master Mix, RT-kontroller och vår bästa i klassen TaqMan Snabb avancerad mastermix. De TaqMan Cells-to-CT Express Kit ger den känslighet du behöver i det snabbaste tillgängliga arbetsflödet: RT-qPCR-resultat för genuttrycksanalys på cirka 70 minuter.

Funktioner av TaqMan Cells-to-CT Express Kit inkluderar:

• Extra enkel och snabb —96 prover redo för RT-qPCR på så lite som 5 minuter
• Ingen tråkig RNA-rening —ingen kolonner, uppvärmning eller centrifugering
• Verifierade arbetsflöden —komplett uppsättning reagenser optimerade för att fungera effektivt direkt från lådan
• Miljövänlig —satsen är REACH-kompatibel, har färre komponenter och kräver färre pipetteringssteg vilket minskar plastkostnaderna
• Rätt storlek kit för automatisering —tillgängliga i 2500 reaktionsstorlek som inkluderar både lysis och RT komponenter

Optimerad kemi utan behov av stopplösning

Genuttrycksanalys från direkt cellys görs enkelt med vår TaqMan Cells-to-CT Express Kit. Med endast ett steg för cellys och inget behov av att lägga till en stopplösning, möjliggör vår Express-teknik ett snabbt arbetsflöde med känsliga, exakta och reproducerbara resultat. 10 100 000 –celler lyseras med hjälp av Express Lysis Solution. Den valfria inkluderingen av ezDNase till Express Lysis Solution möjliggör avlägsnande av genomiskt DNA under cellys. Efter en 5-minuters inkubation vid rumstemperatur används lysatet direkt för omvänd transkription med SuperScript IV VILO Master Mix. När RT-reaktionen är klar utförs qPCR-analys med användning av TaqMan Fast Advanced Master Mix och en TaqMan Genuttrycksanalys.

Effektivt arbetsflöde som möjliggör snabba, exakta och känsliga resultat

RNA framställt med användning av TaqMan Cells-to-CT Express-teknologi påskyndar och effektiviserar avsevärt genuttrycksanalys. Cellysat uppvisar känslighet och specificitet bättre än eller ekvivalent med RNA extraherat med traditionella spinkolonnisoleringsmetoder. Lysförfarandet förbereder samtidigt cellysat för RT-qPCR och tar bort genomiskt DNA på bara fem minuter. Lyseringssteget är enkelt att automatisera med robotplattformar för bearbetning med hög genomströmning av 96- eller 384-brunnars plattor eftersom det sker helt i rumstemperatur. Förfarandet är också ekonomiskt eftersom det bara finns några få pipetteringssteg och, för celler odlade i 96- eller 384-brunnars plattor, inga provöverföringar. Den högeffektiva SuperScript IV VILO RT Master Mix transkriberar även det svåraste (nedbrutna och låg förekommande) RNA samtidigt som den typiska reaktionstiden minskar med 10 minuter. Dessutom TaqMan Cells-to-CT Express Kit är kompatibelt med över 700 000 TaqMan Genuttrycksanalyser.

Maximera känsligheten för detektion

Till skillnad från vissa konkurrerande kit som begränsar mängden lysat i RT-reaktionen till 10 %, TaqMan Cells-to-CT Express Kit kan ta emot 45 % av den totala RT-reaktionsvolymen som cellysat. Dessutom kan cDNA utgöra upp till 45 % av realtids-PCR-reaktionsvolymen. Den stora lysatvolymen i den optimerade RT-reaktionen, tillsammans med den stora cDNA-volymen i den efterföljande realtids-PCR med TaqMan Snabb Advanced Master Mix, leder till maximal känslighet. Mastermixen amplifierar målet exakt och exakt, vilket möjliggör detektering av små kvantiteter av mål, såsom transkript som uttrycks vid låga nivåer.