Invitrogen™ TaqMan™ Snabb Avancerat Cells-to-CT™ Utrustning

De TaqMan Snabb Avancerat Cells-to-Ct Kit är ett komplett cellysatsystem designat för genuttrycksanalys direkt från odlade celler utan RNA-rening. TaqMan Snabb Avancerat Cells-to-Ct cellysreagenser levereras med högsta känslighet Fast Advanced omvänd transkriptionsenzymmix, 2x RT-buffert och bäst i klassen TaqMan Snabb avancerad mastermix. De TaqMan Snabb Avancerad Cells-to-Ct Kit ger dig all känslighet du behöver i det snabbaste arbetsflödet som finns: få genuttrycksanalysresultat från en hel platta med celler på cirka 80 minuter.

• Komplett —optimerat arbetsflöde inkluderar cellysreagens med gDNA-borttagning, ny Fast Advanced RT-enzymmix, buffert och ny TaqMan Snabb avancerad mastermix
• Snabb —7-minuters provförberedelse, inklusive DNase-behandling, vid rumstemperatur
• Lätt —lysera prover i ett rör eller direkt i odlingsplattor
• Robust —utföra genuttrycksanalys på 10 100 000 –celler per prov; resultat ekvivalenta med de från renat RNA
• Efficient —innehåller tillräckligt med reagens för att generera 500 PCR-resultat i realtid från 100 startprover

Unik metod eliminerar behovet av att isolera RNA från odlade celler

De Cells-to-Ct Metoden har ett unikt lysreagens som lyserar celler och skyddar RNA. DNA-borttagning sker samtidigt i 5-minuters lyseringssteget för att spara tid och förbättra användarvänligheten. Lysering stoppas sedan genom tillsats av en ''Stopplösning'' som irreversibelt binder till lyseringsreagenserna.

De TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit innehåller reagenser för omvänd transkription (RT) för cDNA-syntes och TaqMan Fast Advanced Master Mix för PCR-analys i realtid. TaqMan primer/probset säljs separat.

Enkel 7-minuters provberedning

De TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit är designat för 10 100 000 –odlade celler/prov. Celler tvättas i PBS och lyseras i lösning under fem minuter vid rumstemperatur; DNas-behandling kan utföras samtidigt. Lyseringen avslutas vid rumstemperatur genom en 2-minuters inkubation med stopplösning. Lysaten är nu redo för omvänd transkription eller lagring kl– °20 C på kort sikt eller -80 °C på lång sikt.

Maximera känsligheten för detektion

Till skillnad från vissa konkurrerande kit som begränsar mängden lysat i RT-reaktionen till 10 %, TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit kan ta emot 45 % av den totala RT-reaktionsvolymen som cellysat. Dessutom kan cDNA utgöra upp till 45 % av realtids-PCR-reaktionsvolymen. Den stora lysatvolymen i den optimerade RT-reaktionen, tillsammans med den stora cDNA-volymen i den efterföljande realtids-PCR med TaqMan Snabb Advanced Master Mix, leder till maximal känslighet. Mastermixen amplifierar målet exakt och exakt, vilket möjliggör detektering av små kvantiteter av mål, såsom transkript som uttrycks vid låga nivåer.

Minskad provförlust och överföringsfel

Eftersom prover kan bearbetas direkt i odlingsbrunnar (96 eller 384 brunnar) minimeras provhanteringen och risken för provförlust eller överföringsfel, vilket underlättar snabb bearbetning med hög genomströmning. Till skillnad från gammaldags RNA-isoleringsprotokoll i flera steg krävs inga steg för uppvärmning, tvättning eller centrifugering. Satsen förenklar avsevärt en mödosam 30 –60 minuters process och minskar den till 7 minuter.

Kompatibel med guldstandard TaqMan Genuttrycksanalyser

De TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit-arbetsflöde möjliggör oöverträffad utvärdering av genuttryck med någon av> 700 000 TaqMan Genuttrycksanalyser. Detta kit har testats omfattande för specificitet med ett brett urval av TaqMan Genuttrycksanalyser.

Beprövad prestation, bevisad tillsammans

Alla komponenter i TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit har optimerats för konsekvent och pålitlig prestanda. Detta tar bort gissningarna som är involverade i att montera separata provberednings-, RT- och realtids-PCR-kit. Och den TaqMan Fast Advanced Cells-to-CT Kit har validerats med TaqMan Genuttrycksanalyser för ökad kvalitetssäkring, vilket ger dig den känslighet du behöver i det snabbaste arbetsflödet som finns tillgängligt.