Thermo Scientific™ Maxima H Minus Reverse Transcriptase (200 U/μ L)

Thermo Scientific Maxima H Minus Reverse Transcriptase (RT) utvecklades genom in vitro- utveckling av M-MuLV RT. Enzymet har en RNA-beroende och DNA-beroende polymerasaktivitet men saknar RNas H-aktivitet på grund av mutation i RNas H-domänen av M-MuLV RT. Det konstruerade enzymet har dramatiskt förbättrad termostabilitet, 50X högre processivitet, robusthet och ökad synteshastighet jämfört med vildtyp M-MuLV RT.

Den eliminerade RNas H-aktiviteten gör det möjligt för enzymet att producera mycket långa RNA-transkript upp till 20 kb. På grund av dess höga termostabilitet bibehåller enzymet full aktivitet under hela den omvända transkriptionsreaktionen och genererar höga utbyten av cDNA. Reaktionstemperaturen kan höjas till 65 C °för effektiv transkription av RNA-regioner med hög sekundär struktur eller för att förbättra specificiteten med genspecifika primrar. Den extremt höga processiviteten hos Maxima H Minus enzym resulterar i ökad resistens mot vanliga reaktionshämmare, såsom guanidin, formamid och etanol.

Funktioner av Maxima H Minus Reverse Transcriptase omfatta:
• Värmestabil —90 % aktiv efter inkubation vid °50 C i 60 minuter i en reaktionsblandning
• Aktiv upp till 65 °C
•Höga utbyten av cDNA i full längd upp till 20 kb
• Högkänslig —reproducerbar cDNA-syntes från ett brett spektrum av startmängder av totala RNA (1 pg till 5μ g)
• Effektiv —fullständig cDNA-syntes på 15 till 30 minuter
• Ökad resistens mot vanliga reaktionshämmare
• Inkorporerar modifierade nukleotider

Tillämpningar Första
•strängens cDNA-syntes för RT-PCR och RT-qPCR
• Omvänd transkription vid förhöjda temperaturer för att minska effekterna av sekundär struktur
• Syntes av cDNA för kloning och uttryck
• Generering av märkta cDNA-sonder för mikromatriser
• Analys av RNA genom primerförlängning

Relaterade produkter
• Maxima H Minus Reverse Transcriptase (Kat. nr. EP0752)
• Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit (kat.nr. K1652)
• Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit, med dsDNas (kat. nr. K1681)
• Maxima H Minus cDNA Synthesis Master Mix (kat. nr. M1661)
• Maxima H Minus cDNA Synthesis Master Mix, med dsDNas (kat.nr. M1681)