Thermo Scientific™ DNase I-lösning (1 enhet/μ L), RNas-fri

Deoxiribonukleas I (DNas I) är en enkel, glykosylerad polypeptid som bryter ned oönskat enkel- och dubbelsträngat DNA. Enzymet fungerar genom att klyva DNA till 5'-fosfodinukleotid och små oligonukleotidfragment. DNas I tillsätts vanligtvis till cellysreagenser för att avlägsna viskositeten som orsakas av DNA-innehållet i bakteriecellslysat eller för att avlägsna DNA-mallarna från RNA producerade genom in vitro-transkription. Två kvaliteter av DNAs erbjuds, en tillräcklig för proteinarbete och en som är användbar för alla tillämpningar som kräver nedbrytning av DNA där det är avgörande att undvika skador på RNA.

Höjdpunkter:

• Bryter ner och tar bort oönskat DNA från prover
• Klyver både enkelsträngat och dubbelsträngat DNA
• Kompatibel med Thermo Scientific Pierce Celllysreagenser
• Minskar viskositeten hos bakterielysat (proteinextrakt) för att underlätta pipettering
• Levereras som 50 % glycerollager i 10 mM Tris-HCl pH 7,5, 10 mM CaCl ₂ , 10 mM MgCl ₂
• Finns i två bekväma format: RNase-testad för att skydda RNA (delnr 89836) och bekväm proteinextraktionsgrad (delnr 90083)

• Kalciumjoner krävs för DNas I-aktivitet, och spårmängder av Ca++ kan finnas närvarande i tillräckligt höga koncentrationer för att DNas I ska vara aktivt; dock kan användningen av EGTA eller kalciumfria buffertar minska DNas I-aktiviteten till oupptäckbara nivåer
• Höga nivåer (dvs 100 mM) av envärda joner såsom Na+ och K+ kommer att minska DNas I-aktiviteten
• DNas I inaktiveras genom upphettning till 65 C °i 10 minuter
• Kunitz-enhet: 1 Kunitz-enhet är mängden enzym som krävs för att orsaka en ökning av absorbansen vid 260 nm på 0,001/min/ml vid °25 C i 0,1 M NaOAc, pH 5,0, på grund av nedbrytningen av högpolymeriserat DNA
• Nedbrytningsanalysenheter: 1 enhet definieras som mängden enzym som krävs för att fullständigt bryta ned 1 mg plasmid-DNA på 10 minuter vid 37 °C i 10 mM Tris-HCl, pH 7,5, 50 mM _MgCl2 , 13 mM _CaCl2

• Visuellt: Klar vätska
• Koncentration: 1 enhet/ml
• Aktivitet:≥ 100 000 enheter/mg protein
• RNase-kontamination: 20 enheter släpps< 2 % icke-etanolutfällbar när den inkuberas med 3H-märkt Poly(A) RNA
• Funktionsanalys: 1 μL enzym bryts ned< 5% RNA men bryter ner 100% DNA

• Visuellt: Klar, färglös vätska, fri från olösligt material
• Enheter:≥ 2500 enheter/ml
• Enhetsdefinition: 1 enhet definieras som mängden enzym som krävs för att producera en ökning i absorbans vid 260 nm på 0,001/min/ml vid 25 °C av högpolymeriserat DNA

• Eliminering av viskositet orsakad av DNA i proteincelllysat
• Avlägsnande av DNA-mallar från RNA producerade genom in vitro-transkription