Thermo Scientific™ Pierce™ Eldflugan Luc One-Step Glow Assay Kit

Funktioner i Firefly One-Step Luc Glow Assay Kit:

• Känslig—och mycket känslig detektion av eldflugeluciferasaktivitet
• Luktfria—reagenser har ingen dålig eller giftig lukt, vilket eliminerar behovet av att arbeta i en avgashuva
• Bekvämt—enstegsprotokoll med blanda och läsa; inga ytterligare reagenser krävs
• Stabil—ökad signalhalveringstid och stabilitet jämfört med flashanalyser
• Enkel—kräver inte en luminometer med injektorer
• Automationsvänliga—tester med hög genomströmning

Detta glöd-typ luciferasasas-kit är utformat för användning med odlade däggdjursceller som transfekteras med vektorer som uttrycker rätt eldfluge-luciferasrapportarenzym. Flera egenskaper gör kitet särskilt lämpligt för luminometrar utan injektorer och för högkapacitetsscreening (HTS)-applikationer. Det bekväma, enstegs, homogena protokollet minimerar hanteringsstegen för att stödja användningen av automation. Kombinera helt enkelt den medföljande substratlösningen och assaybufferten för att skapa en enda fungerande lösning, och tillsätt den sedan i mikroplattbrunnar som innehåller de transfekterade, behandlade cellerna. Den stabila signalutgången (glöd) från detta system ger flexibilitet vad gäller inkubationstid. När det används med Thermo Scientific Firefly Luc-plasmider tillhandahåller kitet ett mycket känsligt bioluminescerande reporteranalyssystem för detektering av promotor- eller vägaktivitet.

Innehåller:

Analysbuffert och substratlösning (100X)

Krävs

Firefly luciferas och luminometer eller annat instrument som kan övervaka luminescens, såsom Varioskan ALF eller Varioskan LUX mikroplattläsare.

Användningsområden:

• Promotorstudier för analys av cis- och transverkande regulatoriska element
• Drogtestning
• siRNA- och miRNA-screening
• Multiplexade analyser för att studera off-target effekter
• Proteinlokaliseringsrapporteraranalyser
• Signaltransduktionsvägsanalys

Eldflugeluciferas är ett 62 kDa-protein som produceras i naturen av flera arter i familjen Lampyridae, inklusive släktena Photinus och Luciola. Thermo Scientific Röd eldflugaluciferas har ett emissionsområde på 560–700 nm (λmax = 613 nm). Bioluminescerande signal från eldflugeluciferas härstammar från oxidation av D-luciferin. Ljusutsläpp som fångas upp med en luminometer kan korreleras med mängden eldflugeluciferasprotein som produceras och används för att bestämma aktiviteten hos promotorn som driver eldflugeluciferasuttrycket. Eldflugeluciferasbioluminiscens ger forskare en icke-radioaktiv analys för att mäta transkriptionsaktivitet hos regulatoriska element. Firefly luciferasrapportaraktivitet kan användas för att bestämma promotoraktivitet, studera aktivitet i cellen uppströms eller för att avgöra effekten av aktivatorer eller inhibitorer.