Thermo Scientific™ Pierce™ Eldflugan Luc One-Step Glow Assay Kit

Thermo Scientific Pierce Firefly One-Step Luc Glow Assay Kit mäter eldflugans luciferasaktivitet i däggdjurscellodling med ett enda reagenstillskottssteg, vilket gör det idealiskt för högkapacitetsscreening (HTS).

Detta glow-typ luciferasas-assaykit är utformat för användning med odlade däggdjursceller som transfekteras med vektorer som uttrycker rätt eldfluga luciferasrapporterarenzym. Flera egenskaper gör kitet särskilt lämpligt för luminometrar utan injektorer och för högkapacitetsscreening (HTS)-applikationer. Det bekväma, ettstegs, homogena protokollet minimerar hanteringssteg för att stödja användningen av automatisering. Kombinera helt enkelt den medföljande substratlösningen och testbufferten för att skapa en enda fungerande lösning, och tillsätt den sedan i mikroplattbrunnar som innehåller de transfekterade, behandlade cellerna. Den stabila signalutgången (glöd) från detta system ger flexibilitet vad gäller inkubationstid. När det används med Thermo Scientific Firefly Luc-plasmider tillhandahåller kitet ett mycket känsligt bioluminescerande rapporteraranalyssystem för att upptäcka promotor- eller banaktivitet.

Höjdpunkter

• Känslig—och mycket känslig detektion av eldflugeluciferasaktivitet
• Bekvämt—enstegsprotokoll med blanda och läsa; inga ytterligare reagenser krävs
• Stabil—ökad signalhalveringstid och stabilitet jämfört med flashanalyser
• Enkel—kräver inte en luminometer med injektorer
• Automationsvänliga—och lämpade för höggenomströmningsanalyser

Kräver

Firefly-luciferas och luminometer eller annat instrument som kan övervaka luminescens, såsom Varioskan ALF eller Varioskan LUX mikroplattläsare

Användningsområden

• Promotorstudier för analys av cis- och transverkande regulatoriska element
• Drogtestning
• siRNA- och miRNA-screening
• Multiplexade analyser för att studera off-target effekter
• Proteinlokaliseringsrapporteraranalyser
• Signaltransduktionsvägsanalys

Produktinformation

Eldflugeluciferas är ett 62 kDa-protein som produceras i naturen av flera arter i familjen Lampyridae, vilka inkluderar släktena Photinus och Luciola. Thermo Scientific Röd eldfluga luciferas har ett emissionsområde på 560–700 nm (λmax = 613 nm). Bioluminescerande signal från eldflugeluciferas härstammar från oxidationen av D-Luciferin. Ljusutgång som fångas med en luminometer kan korreleras med mängden eldfluge-luciferasprotein som produceras och användas för att bestämma aktiviteten hos promotorn som driver eldflugans luciferasuttryck. Firefly luciferasbioluminescens ger forskare en icke-radioaktiv analys för att mäta transkriptionsaktivitet hos regulatoriska element. Firefly luciferasrapportaraktivitet kan användas för att bestämma promotoraktivitet, studera aktivitet i cellen uppströms eller för att avgöra effekten av aktivatorer eller inhibitorer.