Thermo Scientific™ Pierce™ Högt pH omvänd fas peptidfraktioneringssats

Thermo Scientific Pierce Högt pH omvänd fas peptidfraktioneringskit ökar proteinidentifieringen från LC/MS-analys genom ortogonal peptidfraktionering av komplexa peptidprover.

• Lätt att använda - harts tillhandahålls i engångsspinnkolonnformat
• Förbättrade proteinidentifikationer - proteinidentifikationer ökade med≥ 50 % jämfört med ofraktionerade prover
• Reproducerbar - elueringsprofiler och fraktionerad upplösning varierar med mindre än 20 %
• Optimerad - robust procedur för maximal proteinidentifiering och peptidåtervinning samtidigt som fraktionerad överlappning minimeras
• Kompatibla - reagens validerade med en mängd olika komplexa prover, inklusive TMT™ -märkta peptider

För att möjliggöra djup proteomsekvensering är det ofta nödvändigt att reducera provets komplexitet genom fraktionering i en ortogonal dimension före LC/MS-analys. Pierce High pH Reversed-Phase Peptide Fractionation Kit använder hög pH omvänd fas kromatografi för att separera peptider genom hydrofobicitet och ger utmärkt ortogonalitet mot låg pH omvänd fas LC-MS gradienter.
Satsen har utformats för att förbättra proteinidentifieringen genom användning av ett proprietärt omvändfasharts i ett lättanvänt spinkolonnformat med ett fraktioneringsprotokoll med högt pH. I motsats till stark katjonbytesfraktionering (SCX) kräver hög-pH omvändfasfraktionerna inte ett ytterligare avsaltningssteg före LC/MS-analys.
Peptidfraktioneringssatsen med högt pH-värde innehåller en buffert med högt pH (0,1 % trietylamin) och tolv spinnkolonner som innehåller pH-beständigt omvändfasharts. Varje spinkolonn för fraktionering med omvänd fas möjliggör fraktionering av 10 μtill 100 g peptidprov med hjälp av en mikrocentrifug.
Native, fosforylerade, Tandem Mass Tag™ (TMT )-märkta och andra komplexa peptidblandningsprover kan fraktioneras med detta kit. Att kombinera sökresultaten som genereras av de enskilda fraktionerna hjälper till att förbättra proteinsekvenstäckningen och ökar antalet identifierade proteiner i förhållande till ofraktionerade prover.
Applikationer:

• Minska provets komplexitet för att identifiera mål av intresse
• Genomföra systembiologistudier
• Minska provets komplexitet för att förbättra kvantifieringsstudier