Thermo Scientific™ VitroEase™ Buffertscreeningsats och rengöringsmedel

De Thermo Scientific VitroEase Buffer Screening Kit tillhandahåller förformulerade buffertar och detergenter och en omfattande screeningstrategi för att identifiera optimala proteinförhållanden för analys av en partikelkryo-EM-prov.

Funktioner av VitroEase Kit för buffertscreening inkluderar:
• Enkel att använda —14 buffertar och 6 rengöringsmedel förformulerade i 10X koncentration redo att tillsättas med ditt proteinprov med minimal provspädning
•Bekväma —buffertar och tvättmedel försedda med färgkodade lock som överensstämmer med färgkodad screeningstrategi
•Omfattande —optimerad screeningstrategi som omfattar två omgångar av screening med 24 rutnät med felsökningsförslag
•Flexibelt —brett utbud av vanliga buffertar och rengöringsmedel för cryo-EM provberedning tillräckligt för provoptimering av 400 galler
•Validerade —komponenter och screeningstrategi validerade med enpartikelkryo-EM-analys

Cryo-EM-provscreening utvärderar proteinbeteende i olika buffertar och tillsatsförhållanden med slutmålet att identifiera de optimala förhållandena där proteinet är stabilt, slumpmässigt orienterat och jämnt fördelat i is. Kitbuffertar tillhandahålls med pH från 3,6 till 8,9 förblandade med olika salter och tvåvärda katjoner. Tvättmedel tillhandahålls i 10X koncentrationer med en lättanvänd tabell för att omvandla volym till CMC-koncentration.

Den omfattande screeningstrategin använder två omgångar av screening och 24 rutnät, vilket tar cirka två dagar att bearbeta (bilden nedan). I den första omgången bestäms optimal proteinkoncentration, buffert och pH-förhållanden. I den andra omgången optimeras tvättmedlen ytterligare. En kondenserad strategi tillhandahålls också med 8 rutnät och tar en dag att bearbeta, som kan användas när lite prov är tillgängligt eller för användning med sidoingång eller halvautomatiska provladdningssystem, som Tundra Cryo-TEM.

De rekommenderade screeningstrategierna är utformade för användning med Thermo Scientific Vitrobot Mk4 och Krios , Glacios , Arctica mikroskop med Autoloader-system och EPU multigrid.