Invitrogen™ ZOOM™ Urea

De ZOOM™ IEF Fractionator erbjuder en snabb, tillförlitlig metod för att minska provets komplexitet, berika proteiner med låg förekomst och öka det dynamiska detektionsområdet. Lösningsfas isoelektrisk fokusering med ZOOM™ IEF Fractionator ger reproducerbara separationer på tre timmar. Fraktionerade prover är redo för ytterligare analys med tvådimensionell gelelektrofores (2DE), endimensionell gelelektrofores (1DE) eller tvådimensionell vätskekromatografi/masspektrometri (2D LC/MS).

De ZOOM™ IEF Fractionator System (Figur 1) består av följande komponenter:

• ZOOM™ IEF Fractionator är byggd för säkerhet, tillförlitlighet och hållbarhet. Den innehåller provkammare som är lätta att montera, inbyggda buffertkammare, buffertränna, avtagbar elektrodenhet och säkerhetslock.
• ZOOM™ Skivorna är förgjutna polyakrylamidgeler som eliminerar behovet av manuell förberedelse och minimerar risken för korskontaminering. Dessa immobiliserade buffrade skivor är förmärkta, för engångsbruk och designade för engångsbruk, vilket säkerställer konsekvent och reproducerbar fraktionering. De löser upp prover i så många som 7 fraktioner (med 8 skivor med specifikt pH) till sex fraktioner (med sex skivor med specifikt pH) från pH 3-12. Placera helt enkelt varje skiva mellan provkamrarna i ZOOM™ IEF Fractionator för att tillåta separation i ett specifikt pH-område.
• ZOOM™ Reagenser är reagenser av proteomisk kvalitet, inklusive ZOOM™ 2D Protein Solubilizers urea, tiourea, CHAPS och amfolyter, som säkerställer optimala förhållanden för provberedning.
• Basic Protein Kit som innehåller ZOOM™ Skivor och ZOOM Remsor för IEF av grundläggande proteiner, fokuseringsbuffertar och solubiliseringssatser.

Inställningsprocedur för provkammare och fraktioneringsenhet

Figurerna 4-6 illustrerar montering av provkamrarna och fraktioneringsenheten. Provkammaren och komponenterna passar lätt ihop och erbjuder en läckagesäker tätning. Placera helt enkelt skivor mellan provkamrarna i ZOOM™ IEF Fractionator för att tillåta separation i ett specifikt pH-område. Om du till exempel vill fraktionera proteiner mellan pH 4,6 och 5,4, flankera en provkammare med en ZOOM (r) Skiva med pH 4,6 och en med pH 5,4.

Nedströms bearbetning med 2D gelelektrofores

Efter fraktionering kan de separerade proverna utsättas för ytterligare analys med användning av ett smalt eller brett intervall ZOOM™ Remsor på ZOOM™ IPGRunner™ System. Följ med andra dimensionsanalys med neutralt pH NuPAGE™ ZOOM™ Geler.