Realtids PCR-reagenser och kit
Produkter designade för användning under realtids (kvantitativa) PCR-procedurer. Inkluderar masterblandningar, DNA-polymeraser, omvända transkriptaser, storleksstandarder, kit och reagens.
Omvänd transkriptionspolymeraskedjereaktion (RT-PCR) är en laboratorieteknik som kombinerar omvänd transkription av RNA till DNA och den efterföljande amplifieringen av DNA:t med PCR.
I RT-PCR omvandlar ett omvänt transkriptasenzym en RNA-mall till dess komplementära DNA (cDNA). cDNA:t blir sedan mallen för PCR-amplifiering.
Ett typiskt RT-PCR-kit innehåller huvudkomponenterna som behövs för analysen:
- Buffert
- Primers– en kombination av deoxinukleotidtrifosfater (dNTP) av de fyra baserna adenin (dATP), cytosin (dCTP), guanin (dGTP) och tymin (dTTP)
- Omvänt transkriptasreagens
Kombinationen av RT-PCR- och qPCR-tekniker (ibland märkt RT-qPCR) används ofta i forskning och kliniska laboratorier för att analysera genuttryck och kvantifiera viralt RNA. Eftersom denna metod använder fluorescens för att spåra amplifieringsreaktionen, kan dessa kit också innehålla:
- Fluorogena primers eller märkta
- fluorogena prober
Fluorescerande färgämnesreagenser för cDNA PCR kan köpas separat eller som cDNA-syntessatser.
RT-PCR används vanligtvis för RNA-detektion, molekylär kloning och gensekvensering. RT-qPCR används för genuttrycksanalys, RNAi- eller mikroarrayvalidering, patogendetektion, genetisk testning och annan sjukdomsforskning.